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重組DNA技術(shù)
【考頻指數(shù)】★★★
重組DNA技術(shù)是在人們對自然界基因轉(zhuǎn)移和重組的認(rèn)識基礎(chǔ)上創(chuàng)立的新技術(shù)。自然界基因轉(zhuǎn)移伴發(fā)重組有幾種形式:位點(diǎn)特異的重組、同源重組及轉(zhuǎn)座重組。依賴整合酶、在兩個DNA序列的特異位點(diǎn)間發(fā)生的整合稱位點(diǎn)特異的重組。發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組,又稱基本重組。
一個完整的基因克隆過程應(yīng)包括:目的基因的獲取,克隆基因載體的選擇與改造,目的基因與載體的連接,重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞,篩選出含感興趣基因的重組DNA轉(zhuǎn)化細(xì)胞。
癌基因與抑癌基因
【考頻指數(shù)】★★★
癌基因與抑癌基因的作用機(jī)制涉及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因表達(dá)調(diào)控以及其控制的細(xì)胞分裂和分化過程。
癌基因是指在體外引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化,在體內(nèi)誘發(fā)腫瘤的基因。存在于生物正常細(xì)胞基因組中的癌基因又稱為原癌基因或細(xì)胞癌基因。在正常情況下,這些基因處于靜止或低表達(dá)的狀態(tài),對維持細(xì)胞正常功能具有重要作用。當(dāng)其受到體內(nèi)外致癌因素作用,發(fā)生過度表達(dá)或突變導(dǎo)致激活時,則可導(dǎo)致細(xì)胞癌變。
在某些條件下,如病毒感染、化學(xué)致癌物或輻射作用等,細(xì)胞癌基因結(jié)構(gòu)發(fā)生異常,被異常激活,使得細(xì)胞癌基因表達(dá)產(chǎn)物過多增加,導(dǎo)致細(xì)胞生長增殖和分化異常,部分細(xì)胞發(fā)生惡變而形成腫瘤。癌基因異常激活的主要方式為:獲得啟動子和(或)增強(qiáng)子;染色體易位;原癌基因擴(kuò)增;點(diǎn)突變。腫瘤發(fā)生是一個多步驟的漸進(jìn)過程,需要多種癌基因協(xié)同作用。
對于正常細(xì)胞,調(diào)控生長的基因(如細(xì)胞癌基因等)和調(diào)控抑制生長的基因(如抑癌基因等)的協(xié)調(diào)表達(dá)是控制細(xì)胞正常生長的重要分子機(jī)制之一。
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