《臨床免疫學與檢驗》重要考點(二)
1.鄰苯二胺(OPD)被認為是HRP最為敏感的色原底物之一。
2.四甲基聯(lián)苯胺(TMB):TMB是一種優(yōu)于OPD的新型HRP色原底物。已成為目前ELISA中應用最廣泛的底物。
3.吖啶酯是目前常用的直接標記發(fā)光劑。
4.免疫組化最常用的制片方法有冷凍和石蠟切片。首選的制片方法是冷凍切片。
5.外周血單個核細胞的分離:Ficoll分離液可作為常規(guī)的淋巴細胞分離液,主要用于分離外周血中單個核細胞,是一種單次密度梯度離心分離法,其分布由上到下依次為:稀釋的血漿層、單個核細胞層、粒細胞層和紅細胞層。
6.T細胞表面標志:CD3+CD4+CD8-輔助性T細胞;CD3+CD4-CD8+細胞毒性T細胞;CD4+CD25+調節(jié)性T細胞。
7.T細胞表面主要的CD抗原:
①CD2表達于全部人T細胞和NK細胞表面,因其能與綿羊紅細胞結合,又稱為綿羊紅細胞受體。
②CD3是一種多鏈的糖蛋白,表達于全部T細胞表面,是T細胞的表面標志,是TCR-CD3復合物的重要組成部分。
③CD4/CD8:CD4和CD8分子分別表達于外周血不同的T細胞亞群表面,是區(qū)分T細胞亞群的重要標志。表達CD4的主要是輔助性T細胞,表達CD8的主要是細胞毒性T細胞。
8.膜免疫球蛋白(mIg)又稱為BCR,表達于所有成熟的B細胞和大多數B細胞瘤的細胞表面,屬于免疫球蛋白超家族原型,是B細胞最具特性的表面標志。
9.NK細胞的表面標志:目前NK標志以CD3-、CD16+、CD56+為公認。
10.T細胞功能檢測:T細胞增殖試驗、T細胞分泌功能測定、T細胞介導的細胞毒試驗和體內試驗(特異性抗原皮膚試驗和PHA皮膚試驗)。
11.B細胞功能檢測:B細胞增殖試驗和溶血空斑試驗。
12.溶血空斑試驗:每一個空斑中央含一個抗體形成細胞,空斑數目即為抗體形成細胞數。空斑大小表示抗體形成細胞產生抗體的多少。
13.中性粒細胞功能檢測:趨化功能檢測、吞噬和殺菌功能測定(NBT還原試驗)。
14.巨噬細胞功能檢測:炭粒廓清試驗、吞噬功能檢測、巨噬細胞溶酶體酶的測定、細胞毒作用測定和巨噬細胞促凝血活性測定。
15.前向散射光(FS):信號的強弱與細胞的體積成正比,因此可以說FS是用于檢測細胞或其他粒子物體的表面屬性。
16.側向散射光(SS):SS信號的強弱與細胞或其他顆粒形狀及粒度成正比。SS用于檢測細胞內部結構屬性,可獲得有關細胞內超微結構和顆粒性質的參數。
17.時間分辨熒光免疫測定中多用Eu3+和Tb3+為標志物,其中Eu3+最為常用。
18.超敏反應的分型:Ⅰ型超敏反應,即速發(fā)型超敏反應;Ⅱ型超敏反應,即細胞毒型或細胞溶解型超敏反應;Ⅲ型超敏反應,即免疫復合物型或血管炎型超敏反應;IV型超敏反應,即遲發(fā)型超敏反應。
19.Ⅰ型超敏反應的主要特征有:①超敏反應發(fā)生快,消退快;②常引起生理功能紊亂,較少發(fā)生嚴重的組織細胞損傷;③由特異性IgE型抗體介導,無補體參與;④具有明顯的個體差異和遺傳背景。
20.常見Ⅰ型超敏反應性疾?。孩偎幬镞^敏性休克(青霉素引發(fā)的過敏性休克最為常見);②血清過敏性休克;③呼吸道過敏反應;④消化道過敏反應;⑤皮膚過敏反應(可由藥物、食物、油漆、腸道寄生蟲或冷熱刺激等引起。病變以皮疹為主,特點是劇烈瘙癢。)
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