流式細(xì)胞儀分析技術(shù)的工作原理是什么?
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流式細(xì)胞儀由液流系統(tǒng)、光學(xué)與信號(hào)轉(zhuǎn)換測(cè)試系統(tǒng)和信號(hào)處理及放大的計(jì)算機(jī)系統(tǒng)三大基本結(jié)構(gòu)組成。
工作原理:
采用激光作為激發(fā)光源,保證其具有更好的單色性與激發(fā)效率;利用熒光染料與單克隆抗體技術(shù)結(jié)合的標(biāo)記技術(shù),保證檢測(cè)的靈敏度和特異性;用計(jì)算機(jī)系統(tǒng)對(duì)流動(dòng)的單細(xì)胞懸液中單個(gè)細(xì)胞的多個(gè)參數(shù)信號(hào)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析,保證了檢測(cè)速度與統(tǒng)計(jì)分析的精確性。
標(biāo)記了特異性熒光染料的單細(xì)胞懸液和鞘液,分別經(jīng)硅化管進(jìn)入流動(dòng)室,形成鞘液包裹細(xì)胞懸液的穩(wěn)態(tài)單細(xì)胞液柱,液柱與水平方向的激光束垂直相交,單個(gè)細(xì)胞上標(biāo)記的熒光染料在通過(guò)激光光斑時(shí)被激發(fā)而產(chǎn)生特異性熒光,同時(shí),由于混合細(xì)胞群中因細(xì)胞大小和胞內(nèi)顆粒多少的不同會(huì)被激發(fā)而產(chǎn)生不同的散射光。
一臺(tái)好的流式細(xì)胞儀每秒可測(cè)量15000個(gè)細(xì)胞,測(cè)定1000個(gè)熒光染料分子的粒子。
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