ELISA，即酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），是一種基于抗原與抗體特異性結(jié)合反應(yīng)的高靈敏度和特異性的檢測方法。它主要用于測定血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等生物樣本中的微量蛋白質(zhì)、多肽、激素、病毒抗原或抗體等物質(zhì)。

ELISA的基本原理是利用固相載體（如微孔板）吸附抗原或抗體，然后加入待測樣品及酶標(biāo)二抗，通過洗滌去除未結(jié)合的成分后，再加底物顯色。根據(jù)顏色變化程度來判斷目標(biāo)分子的存在與否及其濃度大小。具體步驟如下：
1. 包被：將已知的抗原（直接法）或抗體（間接法、競爭法等）固定在固相載體表面。
2. 封閉：加入封閉液以減少非特異性結(jié)合。
3. 加樣：向孔中加入待測樣本，使其中的目標(biāo)分子與包被物發(fā)生特異性結(jié)合。
4. 洗滌：去除未結(jié)合的物質(zhì)。
5. 酶標(biāo)抗體孵育：加入能與目標(biāo)分子或其復(fù)合物特異結(jié)合并帶有酶標(biāo)記的二抗。
6. 再次洗滌：去除游離的酶標(biāo)抗體。
7. 底物顯色：加入底物溶液，酶催化底物產(chǎn)生顏色變化。
8. 終止反應(yīng)：加終止液停止顏色變化過程。
9. 測定光密度值（OD）并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

ELISA技術(shù)廣泛應(yīng)用于臨床檢驗、科研實驗等領(lǐng)域。例如，在傳染病診斷中用于檢測乙肝表面抗原、艾滋病病毒抗體等；在腫瘤標(biāo)志物檢測方面，可用于測定CEA、AFP等多種指標(biāo)；此外還被用來研究細(xì)胞因子水平變化、藥物殘留分析等多個方向。