生物素-親和素法化學(xué)染色有哪些技術(shù)呢
生物素-親和素法化學(xué)染色有哪些技術(shù)呢?為了幫助更多考生了解,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家搜集整理如下:
生物素即維生素H,是一種堿性蛋白。親和素具有4個與生物素親和力極高的結(jié)合位點。能夠彼此牢固結(jié)合而不影響彼此的生物學(xué)活性。常用的技術(shù)類型有:
(一)親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物技術(shù)(ABC)
原理:親和素與酶標(biāo)生物素結(jié)合,形成可溶性親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)。其與生物素化抗體(直接法)或生物素化第二抗體(間接法)相遇時,ABC中未飽和的親和素結(jié)合部位即可與抗體上的生物素結(jié)合。
優(yōu)點:敏感性高、親和力強、特異性高、抗體工作濃度低、操作時間短、可以多重標(biāo)記等。
(二)橋聯(lián)親和素-生物素技術(shù)(BRAB技術(shù))
以游離的親和素作為橋聯(lián)劑,將檢測反應(yīng)體系中抗原、生物素化抗體復(fù)合物與標(biāo)記生物素(如酶標(biāo)生物素)聯(lián)結(jié)起來,達(dá)到檢測反應(yīng)分子的目的。
(三)標(biāo)記親和素-生物素技術(shù)(LAB技術(shù))
以標(biāo)記親和素直接與免疫復(fù)合物中的生物素化抗體連接進(jìn)行檢測。該法具有相當(dāng)高的靈敏度。
間接LAB法采用的是生物素化的第二抗體,可以進(jìn)一步提高檢測靈敏度。
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