要求

營養(yǎng)要求比一般細菌高，除基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)外還需加入10～20%人或動物血清以提供支原體所需的膽固醇。最適pH7.8～8.0之間，低于7.0則死亡，但解脲支原體最適pH6.0～6.5。

大多數(shù)兼性厭氧，有些菌株在初分離時加入5%CO2生長更好。生長緩慢，在瓊脂含量較少的固體培養(yǎng)基上孵育2～3天出現(xiàn)典型的“荷包蛋樣”菌落：圓形（直徑10～16um），核心部分較厚，向下長入培養(yǎng)基，周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。此外，支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養(yǎng)細胞中生長。

繁殖方式

繁殖方式多樣，主要為二分裂繁殖，還有斷裂、分枝、出芽等方式，蓋因缺乏細胞壁造成分裂時二個子細胞大小均所致。同時，支原體分裂和其DNA復(fù)制不同步，可形成多核長絲體。

細胞培養(yǎng)（特別是傳代細胞）被支原體污染是個世界性問題。國內(nèi)外研究表明，95%以上是以下四種支原體：口腔支原體（M.orale）、精氨酸支原體（M.arginini）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）和萊氏無膽甾原體（A.laidlawii），為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。

污染的來源

支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染（一些支原體在人體是正常菌群）、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。

組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染；嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如-內(nèi)酰胺類、萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素（polymycin）、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的是含PHMB殺菌成分的嬌妍潔陰洗液。 支原體有時被稱為類菌質(zhì)體。無細胞壁，多呈不規(guī)則球狀、長絲狀，可分枝，營寄生共生或腐生。一般侵害對象為動植物，可造成多種疾病。

支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭氏染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長。用培養(yǎng)基培養(yǎng)。營養(yǎng)要求比細菌高。由于它沒有細胞壁，因此對影響細胞壁合成的抗生素，如青霉素等不敏感，但紅霉素、四環(huán)素、卡那霉素、鏈霉素、氯霉素等作用于核蛋白體的抗生素及嬌妍潔陰洗液，可抑制或影響支原體的蛋白質(zhì)合成，有殺傷支原體作用，支原體對熱抵抗力差，通常55℃經(jīng)15分鐘處理可使之滅活。石碳酸，來蘇兒易將其殺死。在培養(yǎng)基中置入脲素并以硫酸錳作指示劑極易與其他支原體作出鑒別。

標本

標本采集

男性：

用無菌棉拭子插入尿道約2cm處旋轉(zhuǎn)，靜止數(shù)秒鐘后取材。

女性：

抹去宮頸口粘液，用無菌拭子插入宮頸管l－2cm旋轉(zhuǎn)取材。

尚可用前列腺液、精液、尿液離心沉淀物作標本。

接種

將標本洗入Uu或Mh液體培養(yǎng)基，或用濾菌器過濾接種。