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公衛(wèi)助理醫(yī)師考試中,呼吸鏈中各種傳遞體的排列順序是一個?嫉闹R點,醫(yī)學教育網(wǎng)將其重點整理如下:
1.標準氧化還原電位的數(shù)值表示氧化還原能力的大小,標準氧化還原電位負值越大,其還原性越強,容易被氧化;標準氧化還原電位正值越大,其氧化性越強,容易被還原。因此呼吸鏈中各種組分的排列順序應當由低電位依次向高電位排列。
2.還原程度來確定,Chance和Williams使用分光光度法測定離體的線粒體在有氧條件下三羧酸循環(huán)反應達到平衡時,呼吸鏈中各種傳遞體的還原程度。反應達到平衡時從底物一側(cè)到氧一側(cè)的各種傳遞體的還原程度應當是遞減的,底物的一側(cè)最高,氧一側(cè)最低,如下表中數(shù)據(jù)所示。
這種情況好象物理學上的聯(lián)通管,若進水量等于出水量,即流量達到平衡時,離進水口最近的水管中水位最高,離出水管最近的水管中水位最低,從進水管到出水管水位逐漸減低,若把水流視為電子流,就是上述實驗中的情況。
3.使用特異的抑制劑,特異的抑制劑能阻斷呼吸鏈中的特定環(huán)節(jié),阻斷部位的底物一側(cè)的各種傳遞體應為還原型,阻斷部位的氧一側(cè)的各種傳遞體應為氧化型,正象我們阻斷聯(lián)通管的底部一樣,阻斷部位以前的各水管中水是滿的,而阻斷部位以后的各水管中水均流光。
從表中可以看出,F(xiàn)P、Cyt b位于抗霉素A阻斷部位之前,Cytc、cl、aa3位于阻斷部位之后。用不同的抑制劑作此實驗,就可以確定呼吸鏈中各種傳遞體的排列順序。
4.在體外實驗中,將線粒體分成各種復合物,檢測其各自催化的反應,再將其重組,檢測其催化能力。
美國格林(Green)等實驗室成功地將呼吸鏈分離成具有催化活性的四種復合物以及CoQ和Cytc.檢測各個復合物的功能發(fā)現(xiàn):
可以看出CoQ在復合物Ⅰ與Ⅲ,Ⅱ與Ⅲ之間傳遞還原當量,Cyt c在復合物Ⅲ與Ⅳ之間傳遞還原當量。他們又將這四種復合物1:1:1:1的比例混合,加上CoQ和Cyt c重組,基本上恢復了線粒體原有的催化能力。
借助上述實驗方法,呼吸鏈各組分的排列順序已基本明確,但仍有些不一致的看法,其中以CoQ至細胞色素C這一部分研究得還很不清楚,對于Fe-S和CoQ的定位和數(shù)量也有爭議。