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各種細(xì)菌都需在最適生長溫度的范圍內(nèi)生長。當(dāng)外界溫度明顯高于最適生長溫度,細(xì)菌被殺死;如果在低于細(xì)菌的最低生長溫度時(shí),細(xì)菌代謝活動(dòng)受抑制,則出現(xiàn)抑菌作用。
1.高溫:細(xì)菌蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞壁和細(xì)胞膜及酶類因熱力作用發(fā)生變性或凝固,活性消失,代謝發(fā)生障礙導(dǎo)致細(xì)菌死亡。大多數(shù)無芽胞細(xì)菌55℃~60℃加熱30~60min即被殺死;加熱100℃立即死亡,有芽胞的破傷風(fēng)芽胞梭菌需煮沸3h才被殺死。熱力滅菌分濕熱和干熱兩種。在同一溫度下,前者的效力大于后者醫(yī)學(xué)教。育網(wǎng)搜集整理。
(1)濕熱:常用的方法有1)巴氏消毒法:方法有兩種:一是61.1℃~62.8℃30min;另一是71.7℃l5~30s,目前主要用于牛乳消毒。
2)煮沸法:煮沸100℃(1個(gè)大氣壓狀態(tài)下)。醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理5min中可殺死細(xì)菌繁殖體,醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理如于水中加入2%碳酸鈉,則可提高其沸點(diǎn)至105℃,既殺死芽胞,又防止金屬器皿生銹。
3)流通蒸氣滅菌法:常用阿諾(Arnold)流通蒸氣滅菌器或蒸籠。利用一個(gè)大氣壓下100℃水蒸氣進(jìn)行消毒。經(jīng)10~30min細(xì)菌繁殖體被殺死,但對(duì)芽胞的作用不大醫(yī)學(xué)教。育網(wǎng)搜集整理。
4)間歇滅菌法:采用間歇加熱方式達(dá)到滅菌目的。方法是將待滅菌物品置于Arnold滅菌器內(nèi),經(jīng)l00℃加熱15~30min,每日一次,連續(xù)3次。每次滅菌后,取出再置37℃孵箱過夜,使殘存的芽胞發(fā)育成繁殖體,次日再通過流通蒸氣加熱使之被殺死。這樣可達(dá)到殺死芽胞又使不耐100℃的物質(zhì)保存下來。
5)加壓蒸汽滅菌法:利用密閉的耐高壓的高壓蒸汽滅菌器,在蒸汽不外溢的條件下,使鍋內(nèi)壓力增高,蒸汽的溫度也隨之增高,大大加強(qiáng)其殺菌效力。通常在103.4kPa的壓力下達(dá)121.3℃,維持15~20min可殺滅所有細(xì)菌芽胞和繁殖體。醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理本法適用于耐高溫、耐濕物品的滅菌,如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等。
(2)干熱1)燒灼:是常用的干熱滅菌法。微生物實(shí)驗(yàn)室使用的接種環(huán)、接種針、瓶口和試管口常在火焰上燒灼滅菌。
2)干烤:在密閉干烤箱內(nèi)加溫至160℃~170℃維持2h是對(duì)一般玻璃器皿、注射器、瓷器的滅菌方法,適用于高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品醫(yī)學(xué)教。育網(wǎng)搜集整理。
2.低溫:一般細(xì)菌耐低溫,在低溫條件下,細(xì)菌代謝活動(dòng)降低不再繁殖,能較長時(shí)間維持生命,故常用于保存菌種。為避免解凍時(shí)對(duì)細(xì)菌的損傷,可在低溫狀態(tài)下真空抽干,去盡水分,此法稱冷凍真空干燥法,可保存細(xì)菌數(shù)年至數(shù)十年,是目前保存菌種的最好方法。
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