1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚試劑比色法 由于各種蛋白質(zhì)分子中上述兩種氨基酸的組成比例不同，特別是白蛋白含色氨酸為0.2%，而γ-球蛋白中含量達(dá)2%-3%，導(dǎo)致較大的差異。Lowry的改良法在酚試劑中加入Cu2+，集中原法和雙縮脲反應(yīng)兩者的作用，使呈色靈敏度提高。其中75%的呈色依賴(lài)于Cu2+.反應(yīng)產(chǎn)物最佳吸收峰在650-750nm，方法靈敏度為雙縮脲方法的100倍左右。有利于檢測(cè)較微量的蛋白質(zhì)。但試劑反應(yīng)仍易受多種化合物的干擾。

2.采用280nm和215/225紫外吸收值，計(jì)算蛋白質(zhì)含量 280nm 是由于蛋白質(zhì)分子中存在芳香族氨基酸所致。方法的特異性和準(zhǔn)確性受蛋白分子中該種氨基酸的含量比例影響甚大。尿酸和肝紅素在280nm附近有干擾。紫外區(qū)200-225nm是肽健的強(qiáng)吸收峰。在此區(qū)域其吸收值為280nm的10-30倍，將血清稀釋1000-2000倍可以消除干擾物質(zhì)的影響。

3.采用沉淀反應(yīng)進(jìn)行散射比濁法 用磺柳酸、三氯醋酸等配方，此方法甚為簡(jiǎn)便，醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理不需特殊儀器，技術(shù)關(guān)鍵在于：①選擇最佳試劑濃度及溫度；②混勻技術(shù)；③選用的標(biāo)準(zhǔn)；④待測(cè)標(biāo)本中的蛋白濃度。

4.染料結(jié)合法 蛋白質(zhì)可與某些染料特異結(jié)合，如氨基黑（amino black）與考馬亮藍(lán)（comassive brilliant blue ）。這一性質(zhì)除了可以用于電泳后的蛋白質(zhì)區(qū)帶染色，亦可用于總蛋白質(zhì)的定量。缺點(diǎn)是多種蛋白質(zhì)與染料的結(jié)合力不一致?？捡R亮藍(lán)在與蛋白質(zhì)結(jié)合后的吸收峰從465nm移向595nm，這一性質(zhì)可用分光光度法來(lái)定量檢測(cè)。