(一)抗原和抗體濃度、比例

　　抗原和抗體濃度、比例對(duì)抗原抗體反應(yīng)影響最大，是決定性因素，如前所述。

　　(二)電解質(zhì)

　　抗原與抗體特異性結(jié)合后，其親水性減弱，分子表面所帶的電荷易受電解質(zhì)影響而失去，復(fù)合物間的排斥力下降，導(dǎo)致第一階段已形成的可溶性結(jié)合物能進(jìn)一步聯(lián)結(jié)，出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。試驗(yàn)中常用0.85％的NaCl溶液作為稀釋液，以提供適當(dāng)濃度的電解質(zhì)。

　　(三)溫度

　　適當(dāng)?shù)臏囟瓤稍黾涌乖c抗體分子碰撞的機(jī)會(huì)，加速結(jié)合物體積的增大，一般而言溫度越高，形成可見反應(yīng)的速度越快，但過高則會(huì)使抗原或抗體變性失活，影響試驗(yàn)結(jié)果。一般在37℃下進(jìn)行試驗(yàn)，但也有些抗原抗體在4℃下進(jìn)行反應(yīng)較好。

　　(四)酸堿度

　　pH過高或過低都將直接影響抗原或抗體的理化性質(zhì)。例如，醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)|收集整理當(dāng)pH降至3.0左右時(shí)，因接近細(xì)菌抗原的等電點(diǎn)，細(xì)菌表面蛋白或其他基團(tuán)所帶的電荷消失，其相互間的排斥力喪失而導(dǎo)致非特異性酸凝集，影響試驗(yàn)的可靠性。