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無機化學(xué):蛋白質(zhì)濃縮有的多種方法介紹!

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醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為幫助廣大考生順利通過考試,特為大家整理了有機化學(xué)的考點“無機化學(xué):蛋白質(zhì)濃縮有的多種方法介紹!”相關(guān)內(nèi)容,詳細情況如下:

蛋白質(zhì)濃縮有多種方法,有鹽析,超濾,離子交換,有機溶劑沉淀等方法。

有機溶劑沉淀法:有機溶劑能降低溶液的電解常數(shù),從而增加蛋白質(zhì)分子上不同電荷的引力,導(dǎo)致溶解度的降低;另外,有機溶劑與水的作用,能破壞蛋白質(zhì)的水化膜,故蛋白質(zhì)在一定濃度的有機溶劑中的溶解度差異而分離的方法,稱“有機溶劑分段沉淀法”,它常用于蛋白質(zhì)或酶的提純。使用的有機溶劑多為乙醇和丙酮。

高濃度有機溶劑易引起蛋白質(zhì)變性失活,操作必須在低溫下進行,并在加入有機溶劑時注意攪拌均勻以避免局部濃度過大。由此法析出的沉淀一般比鹽析容易過濾或離心沉降,分離后的蛋白質(zhì)沉淀,應(yīng)立即用水或緩沖液溶解,以降低有機溶劑濃度。操作時的pH值大多數(shù)控制在待沉淀蛋白質(zhì)的等電點附近,有機溶劑在中性鹽存在時能增加蛋白質(zhì)的溶解度,減少變性,提高分離的效果,在有機溶劑中添加中性鹽的濃度為0.05mol/L左右,中性鹽過多不僅耗費有機溶劑,可能導(dǎo)致沉淀不好。

沉淀的條件一經(jīng)確定,就必須嚴格控制,才能得到可重復(fù)的結(jié)果。醫(yī)學(xué)教育`網(wǎng)搜集整理有機溶劑濃度通常以有機溶劑和水容積比或用百分濃度表示。有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)分辨力比鹽析法好,溶劑易除去;缺點是易使酶和具有活性的蛋白質(zhì)變性。故操作時要求條件比鹽析嚴格。對于某些敏感的酶和蛋白質(zhì),使用有機溶劑沉淀尤其要小心。

可與水混合的有機溶劑,如酒精、甲醇、丙酮等,對水的親和力很大,能破壞蛋白質(zhì)顆粒的水化膜,在等電點時使蛋白質(zhì)沉淀。在常溫下,有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性。例如酒精消毒滅菌就是如此,但若在低溫條件下,則變性進行較緩慢,可用于分離制備各種血漿蛋白質(zhì)。

以上就是醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編針對“無機化學(xué):蛋白質(zhì)濃縮有的多種方法介紹!”整理的內(nèi)容,希望大家在備考的過程中能夠認真復(fù)習。更多相關(guān)資訊請關(guān)注醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)。

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