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血細(xì)胞血常規(guī)檢驗(yàn)中的注意事項(xiàng)-檢驗(yàn)士

2014-08-21 10:24 來源:
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血細(xì)胞血常規(guī)檢驗(yàn)中的注意事項(xiàng)是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士考試需要了解的知識(shí)點(diǎn),醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理了相關(guān)內(nèi)容,希望對廣大復(fù)習(xí)備考的考生有所幫助。

血細(xì)胞血常規(guī)檢驗(yàn)中的注意事項(xiàng):

血細(xì)胞檢驗(yàn)是指對血液中白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血小板(PLT)、血紅蛋白(HGB)及相關(guān)數(shù)據(jù)的計(jì)數(shù)檢測分析,也稱血常規(guī)檢驗(yàn)。血常規(guī)檢驗(yàn)不僅是診斷各種血液病的主要依據(jù),而且對其它系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別也可提供許多重要信息,是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中最常用、最重要的基本內(nèi)容之一。血常規(guī)檢驗(yàn)的最原始的手段是通過顯微鏡人工鏡檢,隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,高科學(xué)技術(shù)的應(yīng)用,血液細(xì)胞分析儀已成為取代鏡檢進(jìn)行血常規(guī)分析的重要手段,尤其是帶分類的血液分析儀。

無論是鏡檢、還是使用血液分析儀,要獲得血常規(guī)檢驗(yàn)的穩(wěn)定可靠、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù),防止臨床診療人出錯(cuò)誤的判斷,實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)要充分考慮影響血常規(guī)檢驗(yàn)中的多種影響因素,并嚴(yán)格加以控制:

一.標(biāo)本的采集

為了取得準(zhǔn)確、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果,必須取得高質(zhì)量的標(biāo)本。高質(zhì)量的標(biāo)本是高質(zhì)量檢驗(yàn)的第一步。保證血液標(biāo)本中各項(xiàng)細(xì)胞的完整形態(tài)是作為血常規(guī)檢驗(yàn)用的高質(zhì)量的標(biāo)本的最基本的要求。血液細(xì)胞檢驗(yàn)標(biāo)本的制備分為采集和抗凝2個(gè)步驟。

1.標(biāo)本的采集按采血部位的不同,取得血常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本,最常用的途徑是靜脈采血和末梢毛細(xì)血管采血。各類文獻(xiàn)均表明,靜脈血血樣是最可靠的標(biāo)本,手指血是末梢毛細(xì)血管血樣中與靜脈血差異最小且較為穩(wěn)定的血樣。有研究表明,與靜脈血相比,手指血的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性仍然較差:白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯高(+8%)而血小板計(jì)數(shù)明顯低(-9%)。因此,絕大多數(shù)專家建議:血常規(guī)檢驗(yàn)特別是應(yīng)用血液分析儀時(shí),應(yīng)使用靜脈血。

2.標(biāo)本的抗凝用于血常規(guī)檢驗(yàn)的血樣必須經(jīng)抗凝劑抗凝處理,在目前的眾多抗凝劑中,EDTA鹽(EDTA-Na2,EDTA-K2,EDTA-K3)是對白細(xì)胞形態(tài)和血小板影響相對較小的抗凝劑,最適合用于血常規(guī)檢驗(yàn)。除采血因素的影響(生理性因素、采血部位等)外,多數(shù)情況下,血樣的質(zhì)量取決于血液和抗凝劑的比例。血液比例過高時(shí),由于抗凝劑相對不足,血漿中出現(xiàn)微凝血塊的可能性增加,在用于血細(xì)胞分析儀時(shí),微凝血塊可能阻塞儀器,同時(shí)影響一些檢驗(yàn)指標(biāo)。血液比例過低,抗凝劑相對過剩,對檢驗(yàn)指標(biāo)會(huì)造成嚴(yán)重影響。血液經(jīng)EDTA抗凝后,白細(xì)胞的形態(tài)會(huì)發(fā)生改變,這種改變和時(shí)間及EDTA濃度有關(guān)。EDTA的最佳濃度(與血液比)為1.5mg/ml,如果血樣少,EDTA的濃度達(dá)到2.5mg/ml,中性粒細(xì)胞腫脹、分葉消失,血小板腫脹、崩解、產(chǎn)生正常血小板大小的碎片,這些改變都會(huì)使血常規(guī)檢驗(yàn)和血細(xì)胞計(jì)數(shù)得出錯(cuò)誤結(jié)果。這一點(diǎn)在用自動(dòng)血細(xì)胞分析儀時(shí)尤為重要。

靜脈血和末梢血均可經(jīng)抗凝劑抗凝成全血標(biāo)本(標(biāo)本中不含稀釋液,或?qū)?biāo)本造成的稀釋的影響極?。?,顯而易見,末梢血抗凝標(biāo)本要達(dá)到合適的血液和抗凝劑的比例是非常困難的。因此,多數(shù)專家建議,在制備全血比例是非常困難的。因此,多數(shù)專家建議,在制備全血標(biāo)本時(shí),應(yīng)使用定量的含EDTA鹽的真空采血管采集靜脈血。

無論鏡檢,或是使用血液細(xì)胞分析儀,由于絕大多數(shù)的對標(biāo)本稀釋的稀釋液中含有抗凝劑,在一定量的稀釋液中可直接加入微量靜脈血或末梢血液(10-40μl)即可制備成通常所說的預(yù)稀釋標(biāo)本。多數(shù)情況下,預(yù)稀釋標(biāo)本的制備適用于末梢血的血樣醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

二.標(biāo)本的稀釋

血液是由血細(xì)胞和血漿兩部分組成的紅色粘稠混懸液。在進(jìn)行血細(xì)胞檢驗(yàn)計(jì)數(shù)時(shí),直接用血液計(jì)數(shù)是困難的,無論是鏡檢還是用血細(xì)胞分析儀,血液均需合適準(zhǔn)確的稀釋后才能進(jìn)行血細(xì)胞的檢驗(yàn)計(jì)數(shù)?;谘?xì)胞分析儀的基本原理,在血細(xì)胞分析儀的設(shè)計(jì)應(yīng)用中,稀釋倍數(shù)和計(jì)數(shù)容量是最重要的設(shè)計(jì)指標(biāo)之一。

自50年代初,美國庫爾特先生研制了電阻法(小孔原理)血細(xì)胞分析儀以來,血細(xì)胞的稀釋液為介質(zhì)的流動(dòng)的形式通過傳感器測量計(jì)數(shù),血細(xì)胞通過傳感器時(shí)一定需要排隊(duì)通過,否則可能就會(huì)造成重合損失。

實(shí)際應(yīng)用時(shí),是將血液稀釋于稀釋液中形成稀釋標(biāo)本(稀釋比為1:N),以流動(dòng)檢測的方式測出一定量(V)的稀釋標(biāo)本內(nèi)的血細(xì)胞數(shù)(T),經(jīng)換算后得出血液中的細(xì)胞濃度(L):L-T×N/V.由此可見,準(zhǔn)確合理的稀釋倍數(shù)(在用于儀器時(shí),RBC.PLT的稀釋倍數(shù)一般為1:10000至1:3000;WBC.HGB的稀釋倍數(shù)一般為1:250左右)和準(zhǔn)確、穩(wěn)定的測量容量是血細(xì)胞檢測的又一重要基礎(chǔ)。稀釋倍數(shù)過低,會(huì)形成細(xì)胞排隊(duì)通過傳感器的重合缺損;稀釋倍數(shù)過大,則會(huì)造成一定測量容量內(nèi)血細(xì)胞的數(shù)量過少,這都會(huì)嚴(yán)重影響血液細(xì)胞檢驗(yàn)的測量精度。

三.標(biāo)本的儲(chǔ)存

如前文所述,抗凝劑因時(shí)間和濃度的不同,會(huì)造成對血細(xì)胞形態(tài)的影響。有研究表明,用EDTA抗凝靜脈血標(biāo)本,在標(biāo)本收集后的5分鐘內(nèi)或30分鐘后,8小時(shí)內(nèi)(室溫)檢測,可以得到最佳的檢測結(jié)果。如果不需要血小板和白細(xì)胞分類的準(zhǔn)確數(shù)據(jù),則標(biāo)本可以在2℃-8℃的條件下存入至24小時(shí)。

預(yù)稀釋標(biāo)本一般需要在標(biāo)本制備后10分鐘內(nèi)予以測量;如果稀釋液中添加細(xì)胞穩(wěn)定劑,預(yù)稀釋標(biāo)本的存放時(shí)間也不可超過4小時(shí)。

總之,影響血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的因素很多,要想取得準(zhǔn)確的檢驗(yàn)數(shù)據(jù),就要在實(shí)驗(yàn)的每一個(gè)步驟中都嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。本文所講述的內(nèi)容,僅僅是對血常規(guī)檢驗(yàn)中注意事項(xiàng)的部分總結(jié),可能存在的不足和缺陷,還是請常年處于臨檢一線工作中的老師們批評、指正。

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