醫(yī)學教育網(wǎng)小編整理了色譜法的應用及色譜條件選擇如下,請各位考生仔細查看。
色譜法應用:
(1)分離混合物 在中藥提取物的有效部位中,往往含有結構相似、理化性質(zhì)相似的幾種成分的混合物,用一般的化學方法很難分離,可用色譜法將它們分開。
(2)精制化合物 在提取、分離得到有效成分時,往往含有少量結構類似的雜質(zhì),不易除去,也可利用色譜法除去雜質(zhì)得到純品。
(3)鑒定化合物 在一定條件下,純粹的化合物在薄層色譜或紙色譜中都有一定的Rf值,在氣相色譜和高效液相色譜中有一定的保留時間,所以利用色譜法可以鑒定化合物的純度或利用標準品的對照來初步確定兩種性質(zhì)相似的化合物是否為同一物質(zhì)。
色譜條件選擇:
由于中藥有效成分類型不同,性質(zhì)各異,所以選擇色譜條件是不同的。
一般生物堿的分離可用硅膠或氧化鋁柱色譜,對于極性較高的生物堿可用分配色譜,而對季銨型水溶性生物堿也可用分配色譜或離子交換色譜。
苷類的色譜分離往往決定于苷元的性質(zhì),如皂苷、強心苷,一般可用分配色譜或硅膠吸附色譜。
揮發(fā)油、甾體、萜類包括萜類內(nèi)酯,往往首選氧化鋁及硅膠色譜。
黃酮類化合物、鞣質(zhì)等多元酚衍生物可用聚酰胺吸附色譜。
有機酸、氨基酸一般可選用離子交換色譜,有時也用分配色譜。有些氨基酸也可用活性炭吸附色譜。
對于大分子化合物,如多肽、蛋白質(zhì)、多糖,常用凝膠色譜。
總的來說,對非極性成分往往考慮用氧化鋁或硅膠吸附色譜;若極性較大則采用分配色譜或弱吸附劑吸附色譜;對酸性、堿性、兩性成分可采用離子交換色譜,有時也可用吸附色譜及分配色譜等。