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【考頻指數(shù)】★★★
1.流式細胞術(shù):是用熒光活化細胞分類儀(FACS)通過細胞表面CD分子的檢測而對細胞進行分類和定量的方法。
2.增殖試驗:
1)3H-TdR摻入法:在體外培養(yǎng)的條件下,T淋巴細胞受特異性抗原或非特異性有絲分裂麻如刀豆蛋白A(ConA)刺激后可發(fā)生大量增生,轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞。在此過程中,T細胞的DNA合成明顯增加,加入氚標記的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)會被摻入DNA分子中。
2)MTT比色法:MTT是一種噻唑鹽,淡黃色可溶性物質(zhì)。細胞增殖時,線粒體中的琥珀酸脫氫酶將MTT還原為紫褐色的甲臜顆粒,該顆粒被隨后加入的異丙醇或二甲基亞砜所溶解。
3.細胞毒試驗:用細胞毒試驗可檢測CTL和NK細胞的靶細胞殺傷活性,具體的做法是:將效應(yīng)細胞(CTL或NK)和用51Cr標記的靶細胞相互作用4小時,被殺傷的靶細胞可釋放51Cr。測定培養(yǎng)上清中51Cr放射性可判定細胞毒的強弱,放射性越高代表細胞毒活性越強。
4.細胞凋亡檢測
1)瓊脂糖凝膠電泳法
2)FACS法
3)TUNEL法
5.細胞因子的生物活性檢測
1)細胞增殖法:可用細胞增殖法檢測細胞因子的促細胞生長活性。
2)細胞病變抑制法:可采用細胞病變抑制法檢測干擾素的抗病毒活性。
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