考點匯總!雙向擴散試驗知識點及練習題
雙向擴散試驗是檢驗職稱考試會涉及的內(nèi)容,為了幫助檢驗職稱考生了解,助力檢驗職稱考生復(fù)習,醫(yī)學教育網(wǎng)為大家整理如下:
【知識點名稱】雙向擴散試驗
【進階攻略】該知識點需熟練掌握沉淀線的有無、形態(tài)和位置與抗原抗體之間的關(guān)系。
【知識點詳情】
雙向擴散試驗是讓抗原和抗體雙方都在瓊脂中各自向?qū)Ψ綌U散,在比例恰當之處形成抗原抗體沉淀線,觀察這種沉淀線的位置、形狀以及對比關(guān)系,可對抗原或抗體進行定性分析。根據(jù)試驗形式也可分為試管法和平板法兩種。
(一)試管法
(二)平板法 是鑒定抗原抗體的最基本、最常見的方法之一。根據(jù)沉淀線的有無、形態(tài)和位置可作如下分析:
1.抗原或抗體的存在與否以及相對含量的估計 沉淀線的形成是根據(jù)抗原抗體兩者比例所致,沉淀線如果靠近抗原孔,則表示抗體含量較大;沉淀線如果靠近抗體孔,則表示抗原含量較大;不出現(xiàn)沉淀線則表明無對應(yīng)的抗體或抗原或者抗原過量。
2.抗原或抗體相對分子量的分析 抗原或抗體在瓊脂內(nèi)自由擴散,其速度受分子量的影響。分子量小者擴散快,反之則較慢。由于慢者擴散圈小,局部濃度則較大,形成的沉淀線彎向分子量大的一方;如果兩者分子量大致相等,則形成直線。
3.抗原性質(zhì)的分析 兩種受檢抗原的性質(zhì)可完全相同、部分相同或完全不同。三種情況在雙向擴散試驗中表現(xiàn)如下:兩條沉淀線互相吻合相連,表明抗體與兩個抗原中的相同表位結(jié)合而沉淀,兩個抗原相同;沉淀線呈部分相切,說明兩個抗原之間有部分相同;兩條沉淀線交叉而過,說明兩個抗原完全不同。
4.抗體效價的滴定 雙向擴散試驗是抗血清抗體效價滴定的常規(guī)方法。固定抗原的濃度,稀釋抗體;或者抗原和抗體雙方皆作不同的稀釋,經(jīng)過自由擴散,形成沉淀線,以出現(xiàn)沉淀線最高的抗體稀釋度為該抗體的效價。
5.抗原或抗體純度鑒定 用混合抗原或抗體鑒定抗體或抗原,出現(xiàn)一條沉淀線說明待測抗原或抗體純,出現(xiàn)多條沉淀線說明不純。
雙向擴散試驗簡單易行,用途廣泛,但該技術(shù)靈敏度低,出現(xiàn)結(jié)果慢,不能精確定量,這些弱點在相當程度上限制了它的應(yīng)用。
【知識點隨手練】
一、單項選擇題
1.關(guān)于雙向擴散試驗下列錯誤的是
A.平板法是鑒定抗原抗體的最基本、最常見的方法之一
B.不出現(xiàn)沉淀線則表明無對應(yīng)的抗體或抗原或者抗原過量
C.抗原或抗體在瓊脂內(nèi)自由擴散,其速度受分子量的影響
D.雙向擴散試驗是抗血清抗體效價滴定的常規(guī)方法
E.雙向擴散試驗簡單易行,用途廣泛,該技術(shù)靈敏度高,出現(xiàn)結(jié)果快,能精確定量
2.雙向瓊脂擴散試驗中,若抗原抗體含量相同,但抗原的分子量比抗體大,則沉淀線應(yīng)為
A.靠近抗原孔,且弧線彎向抗原側(cè)
B.靠近抗原孔,且弧線彎向抗體側(cè)
C.靠近抗體孔,且弧線彎向抗原側(cè)
D.靠近抗體孔,且弧線彎向抗體側(cè)
E.居于抗原孔和抗體孔中間,且弧線彎向抗原側(cè)
【知識點隨手練參考答案及解析】
一、單項選擇題
1.【答案及解析】E。雙向擴散試驗簡單易行,用途廣泛,但該技術(shù)靈敏度低,出現(xiàn)結(jié)果慢,不能精確定量,這些弱點在相當程度上限制了它的應(yīng)用。
2.【答案及解析】E。沉淀反應(yīng)中,沉淀線靠近抗原孔,提示抗體含量大;靠近抗體孔,提示抗原含量多??乖贵w在瓊脂內(nèi)擴散速度受分子量的影響,分子量小的擴散快。由于速度慢者擴散圈小,局部濃度大,形成的沉淀線彎向分子量大的一方。
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