被認為是HRP最敏感的色原底物是TMD還是OPD?
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HRP最為敏感的色原底物是OPD。
四甲基聯(lián)苯胺(TMB):TMB是一種優(yōu)于OPD的新型HRP色原底物。TMB經(jīng)HRP作用后變?yōu)樗{色,加入硫酸終止反應(yīng)后變?yōu)辄S色,最大吸[醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)]收峰波長為450nm。TMB具有穩(wěn)定性好,成色無需避光,無致突變作用等優(yōu)點,已成為目前ELISA中應(yīng)用最廣泛的底物。缺點是水溶性差。
鄰苯二胺(OPD):OPD被認為是HRP最為敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下顯橙黃色,加強酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng)后呈棕黃色,最大吸收峰在492nm波長。OPD是ELISA中應(yīng)用最早的底物。
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