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方法名稱:
維生素B6的測定—高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:
本方法采用高效液相色譜法測定維生素B6(C8H10NO5P)的含量。
本方法適用于維生素B6。
方法原理:
供試品制成流動相溶液,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長291nm處檢測維生素B6吸收值,計算出其含量。
試劑:
1. 甲醇
2. 0.04%戊烷磺酸鈉溶液(用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3.0)
3. 冰醋酸
儀器設(shè)備:
1. 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按維生素B6峰計算不低于4000。
1.3 紫外吸收檢測器
2. 色譜條件
2.1 流動相:0.04%戊烷磺酸鈉溶液 甲醇=85 15。
2.2 檢測波長:291nm
2.3 柱溫:室溫
試樣制備:
1. 稱取供試品
精密稱取本品適量。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取維生素B6對照品適量,同供試品配制,搖勻,即得。
3. 供試品溶液的制備
將供試品加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL含有約0.1mg的溶液,搖勻,即得。
注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟:
分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長291nm處測定維生素B6的吸收值,計算出其含量醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
參考文獻(xiàn):
中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p.668。