1.神經(jīng)系統(tǒng)
程嘉藝等采用Y迷宮法、回避反射法分別觀察了金匱腎氣丸對于氫化考的松造成的陽虛小鼠及18月齡以上自然衰老大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,發(fā)現(xiàn)金匱腎氣丸能明顯增強(qiáng)陽虛小鼠與老齡大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能。同時(shí)測定了實(shí)驗(yàn)小鼠腦組織內(nèi)線粒體脂質(zhì)過氧化物的水平,結(jié)果顯示,金匱腎氣丸可顯著對抗氫化考的松造成的小鼠腦組織線粒體脂質(zhì)過氧化物水平提高。王東方等通過檢測豚鼠的腦干聽覺誘發(fā)電位(ABR),觀察動(dòng)物的外觀行為、體溫變化、耗氧量以及應(yīng)激能力的改變等,探討了金匱腎氣丸對于慶大霉素耳蝸毒性損害的拮抗作用。結(jié)果顯示,金匱腎氣丸在明顯降低耳毒豚鼠腦干聽覺誘發(fā)電位的同時(shí),對于動(dòng)物整體功能狀態(tài)的修復(fù)亦具有良好的作用。
2.免疫系統(tǒng)
2.1劉敘儀等觀察了金匱腎氣丸水煎液對雌性Swiss小鼠免疫功能的影響,發(fā)現(xiàn)本方可明顯增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,治療組小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率、吞噬指數(shù)均明顯高于正常水對照組,組間療效差異顯著(P<0.01)。
2.2觀察金匱腎氣丸對免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。方法:用環(huán)磷酰胺制造小鼠免疫抑制模型,以巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能(半體內(nèi)法)、免疫器官重量、血清溶血素含量(分光光度計(jì))、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等為指標(biāo)。結(jié)果:對免疫抑制小鼠,金匱腎氣丸能提高腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能;能提高胸腺重量;能提高溶血素含量;能促進(jìn)淋巴轉(zhuǎn)化功能;能提高紅細(xì)胞數(shù)。結(jié)論:金匱腎氣丸具有增強(qiáng)免疫抑制小鼠免疫功能的作用。
3.內(nèi)分泌系統(tǒng)
周超凡等指出,腎陽虛的人或動(dòng)物都可能表現(xiàn)出下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)的功能紊亂,而服用金匱腎氣丸治療后,上述病變常能得到不同程度的改善甚或完全恢復(fù)正常。說明溫補(bǔ)腎陽類藥物在具有可的松樣正作用的同時(shí),避免了激素類藥物的副反應(yīng),且能拮抗外源性激素的反饋性抑制,防止腎上腺皮質(zhì)的萎縮。
4.生殖系統(tǒng)
4.1陳慶平等以8%金匱腎氣丸水溶液1ml/20g灌胃給藥,每日1次,連續(xù)8周,觀察了本方對生育末期小鼠體內(nèi)性激素水平的影響,發(fā)現(xiàn)該方可顯著提高小鼠體內(nèi)睪丸激素、促卵泡激素水平。程嘉藝等觀察了金匱腎氣丸對于老齡大鼠體內(nèi)性激素水平的影響。結(jié)果表明,金匱腎氣丸能明顯提高老年雄性大鼠血清睪丸酮及老年雌性大鼠血清雌二醇的含量,并可顯著增加老年雄性大鼠雙側(cè)睪丸重量。狄俊英等研究發(fā)現(xiàn)金匱腎氣丸可明顯提高大鼠受損睪丸組織中的cAMP水平,說明通過第二信使cAMP的含量調(diào)節(jié)而起到調(diào)整體內(nèi)激素水平和恢復(fù)內(nèi)分泌功能正常的作用,可能是金匱腎氣丸的作用機(jī)制之一。
4.2以“勞倦過度、房室不節(jié)”腎陽虛小鼠為模型,觀察金匱腎氣丸對腎陽虛小鼠精子質(zhì)量的影響。結(jié)果腎陽虛模型組小鼠與正常對照組相比,精子活率和精子密度明顯下降(P〈0.05);而金匱腎氣丸給藥組小鼠與模型組相比,精子活率和精子密度明顯升高(P〈0.05)。表明金匱腎氣丸可以改善腎陽虛小鼠的精子質(zhì)量。
4.3評價(jià)金匱腎氣丸對BPH大鼠的療效,并探討其作用機(jī)理。方法:實(shí)驗(yàn)研究采用SD大鼠去勢后皮下注射丙酸睪丸酮法復(fù)制BPH模型,用形態(tài)計(jì)量學(xué)方法研究各組前列腺組織的形態(tài)改變;用免疫組化法結(jié)合圖像分析系統(tǒng)研究實(shí)驗(yàn)各組前列腺組織的誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、內(nèi)皮素-1(ET-1)的表達(dá)。結(jié)果:金匱腎氣丸低劑量組可以縮小增生前列腺腺體的體積,并增加iNOS的表達(dá),不能影響ET-1的表達(dá),金匱腎氣丸高、中劑量組不能縮小增生前列腺腺體的體積,也不能影響iNOS及ET-1的表達(dá)。結(jié)論:金匱腎氣丸用于治療BPH,能縮小前列腺體積,作用機(jī)理是通過增加前列腺組織iNOS含量,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的。
5.循環(huán)系統(tǒng)
張建新等通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察了金匱腎氣口服液對于心血管系統(tǒng)的藥理作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,金匱腎氣口服液能明顯延長小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間,可顯著改善垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血,能明顯降低氯仿所致小鼠心室顫動(dòng)的發(fā)生率,可顯著延長烏頭堿誘發(fā)大鼠心律失常出現(xiàn)的時(shí)間,能明顯抑制大鼠血小板的聚集功能,為臨床應(yīng)用該方防治心血管疾病提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
6.物質(zhì)代謝
6.1糖類代謝島津孝探討了金匱腎氣丸提取物對于大鼠耐糖能力的影響:在無麻醉的條件下給大鼠作葡萄糖口服負(fù)荷及靜脈負(fù)荷試驗(yàn),同時(shí)分析血中葡萄糖及胰島素的動(dòng)態(tài)變化情況,借以觀察金匱腎氣丸對于大鼠耐糖能力的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,金匱腎氣丸通過作用于交感神經(jīng)系統(tǒng)可能產(chǎn)生降血糖效果。
6.2脂類代謝余美娟等觀察了金匱腎氣丸對于鵪鶉食餌性高脂血癥的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,金匱腎氣丸組的血清總膽固醇(TCH)和甘油三脂(TG)含量均明顯地低于高脂組,而血清高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-ch)及α-脂蛋白含量同高脂組相比則顯著增加,表明金匱腎氣丸可提高高脂膳食動(dòng)物血清HDL-ch及α-脂蛋白含量,對于動(dòng)物高膽固醇血癥、高甘油三脂血癥的形成具有一定的抑制作用。 6.3氨基酸代謝動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明,白內(nèi)障眼病者其晶狀體中GSH(還原型谷胱甘肽)和GSSG(氧化型谷胱甘肽)含量顯著減少。小曾戶洋報(bào)道,以24月齡Wistar大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,按每日1g/kg劑量給予口服金匱腎氣丸提取物,連續(xù)12個(gè)月,研究給藥后大鼠36月齡時(shí)機(jī)體內(nèi)谷胱甘肽的代謝情況。發(fā)現(xiàn)金匱腎氣丸組大鼠晶狀體及精巢中GSH、GSSG含量顯著上升,血漿中GSH含量亦明顯升高,為該方預(yù)防白內(nèi)障眼病的發(fā)生提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
7.抗疲勞作用
蔣珠芬等取昆明種小鼠30只,雌雄兼用,隨機(jī)分組,分別觀察了金匱腎氣丸及金匱腎氣口服液的抗疲勞作用。灌胃給藥30分鐘后,做游泳試驗(yàn)(抗疲勞試驗(yàn)),結(jié)果表明金匱腎氣丸及金匱腎氣口服液均可使小鼠存活率提高50%以上。
8.抗衰老作用
劉宏陽等觀察了金匱腎氣丸水煎液對于不同年齡小白鼠的抗衰老作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該方能減輕自由基對肝組織的損傷,從而使肝臟脂質(zhì)過氧化物(LPO)含量下降;同時(shí),該方還具有一定的抑制腦單胺氧化酶(MAO)活性的作用,從而說明金匱腎氣丸可能是一種良好的抗衰劑。
9.抗突變作用
王明艷等以ICR純種小鼠的骨髓細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料,以公認(rèn)的誘變劑環(huán)磷酰胺(CPP)誘導(dǎo)所致姐妹染色單體互換(SCE)作為檢測指標(biāo),觀察了金匱腎氣丸對于ICR小鼠骨髓細(xì)胞SCE的影響。發(fā)現(xiàn)金匱腎氣丸對于SCE具有明顯的抑制作用,從而提示該方在預(yù)防腫瘤方面具有潛在的價(jià)值。
10.抗輻射損傷
鄭小偉等觀察了金匱腎氣丸對于SD大鼠慢性電離輻射損傷的防護(hù)作用,結(jié)果顯示金匱腎氣丸能明顯降低輻射誘發(fā)的大鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變率,能很好地糾正輻射所引起的大鼠白細(xì)胞總數(shù)下降,表明該丸具有良好的減輕輻射損傷的作用。
11.研究旨在應(yīng)用基因芯片探討金匱腎氣丸對“勞倦過度、房室不節(jié)”腎陽虛小鼠模型腦基因改變,以期從基因水平上研究其藥物作用機(jī)理。方法:對照組、造模組和治療組(給予金匱腎氣丸)雄性小鼠各為10只、15只和10只。3組均予正常喂養(yǎng),對照組和造模組每天灌胃蒸餾水0.5ml/只,治療組每天灌胃金匱腎氣丸混懸液0.5mL/X,造模組和治療組采用雄雌鼠比例1:6同籠喂養(yǎng)和雄鼠每日游泳30~40min達(dá)4周,以誘導(dǎo)產(chǎn)生“勞倦過度、房室不節(jié)”
腎陽虛證。用36Kmousegenomearray鼠腦芯片檢測正常對照組和腎陽虛模型組鼠腦基因,并以二者熒光信相對強(qiáng)度比值>12和≤0.5篩選差異顯著基因,并進(jìn)一步查閱北京博奧生物分子注釋系統(tǒng),進(jìn)行基因功能歸類。結(jié)果:造模組誘導(dǎo)成功“勞倦過度、房室不節(jié)”腎陽虛鼠模型,同時(shí)通過基因芯片檢測,分別繪制了造模組/對照組與治療組/造模組基因表達(dá)譜的散點(diǎn)圖。造模對照組共篩選出186個(gè)差異表達(dá)基因,其中上調(diào)基因150個(gè),下調(diào)基因36個(gè)。治療生臣/造模組篩選出299個(gè)差異表達(dá)基因,其中上調(diào)基因114個(gè),下調(diào)基因185個(gè)。造模生臣/對照組上調(diào)基因而治療造模組基因下調(diào)的有58個(gè)基因,其主要是與炎癥/免疫、神經(jīng)傳遞/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄/翻譯、代謝以及影響多巴胺生成限速酶有關(guān)的基因。造模復(fù)臣/對照組下調(diào)基因而治療生臣/造模組基因上調(diào)的基因9個(gè),其主要與生長激素、黑色素、細(xì)胞周期/細(xì)胞結(jié)構(gòu)、神經(jīng)傳遞/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝相關(guān)的基因。結(jié)論:金匱腎氣丸可使腎陽虛小鼠模型顯著下調(diào)的生長激素、黑色素顯著上調(diào)并促進(jìn)細(xì)胞增殖,從而在基因水平上探討了金匱腎氣丸的藥物作用機(jī)理。