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基因表現(xiàn)-微生物

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基因表現(xiàn)又稱(chēng)基因表達(dá),有時(shí)直接以表現(xiàn)或表達(dá)來(lái)稱(chēng)呼)細(xì)胞在生命過(guò)程中,把儲(chǔ)存在DNA順序中遺傳信息經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯,轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子。生物體內(nèi)的各種功能蛋白質(zhì)和酶都是同相應(yīng)的結(jié)構(gòu)基因編碼的。差別基因表達(dá)(differentialgeneexpression)指細(xì)胞分化過(guò)程中,奢侈基因按一定順序表達(dá),表達(dá)的基因數(shù)約占基因總數(shù)的5%~10%.也就是說(shuō),某些特定奢侈基因表達(dá)的結(jié)果生成一種類(lèi)型的分化細(xì)胞,另一組奢侈基因表達(dá)的結(jié)果導(dǎo)致出現(xiàn)另一類(lèi)型的分化細(xì)胞,這就是基因的差別表達(dá)。其本質(zhì)是開(kāi)放某些基因,關(guān)閉某些基因,導(dǎo)致細(xì)胞的分化。 在特定時(shí)間里,很大一部分DNA并不轉(zhuǎn)錄成信使RNA,細(xì)胞只生產(chǎn)那些代謝需要的酶和其他蛋白質(zhì)。生物體有決定哪些基因表達(dá),哪些基因不表達(dá)的整套調(diào)節(jié)機(jī)制,這是生物生長(zhǎng)和分化的基礎(chǔ)。基因工程就是研究基因在異體中表達(dá)的技術(shù)醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

轉(zhuǎn)錄

基因表現(xiàn)的第一步是轉(zhuǎn)錄,在RNA聚合酶的催化下,以DNA為模板合成mRNA的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)錄(transcription)。在雙鏈DNA中,作為轉(zhuǎn)錄模板的鏈稱(chēng)為模板鏈(template strand),或反義鏈(antisensestrand);而不作為轉(zhuǎn)錄模板的鏈稱(chēng)為編碼鏈(coding strand),或有義鏈(sense strand)。在雙鏈DNA中與轉(zhuǎn)錄模板互補(bǔ)的一條DNA鏈即編碼鏈,它與轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的差異僅在于DNA中T變?yōu)镽NA中的U.在含許多基因的DNA雙鏈中,每個(gè)基因的模板鏈并不總是在同一條鏈上,亦即一條鏈可作為某些基因的模板鏈的,也可是另外一些基因的編碼,轉(zhuǎn)錄后要進(jìn)行加工,轉(zhuǎn)錄后的加工包括:

剪接

基因表現(xiàn)一個(gè)基因的外顯子和內(nèi)含子都轉(zhuǎn)錄在一條原始轉(zhuǎn)錄物RNA分子中,稱(chēng)為前mRNA(pre-mRNA),又稱(chēng)核內(nèi)異質(zhì)RNA(heterogenuous nuclear RNA,huRNA)。因此前mRNA分子既有外顯子順序又有內(nèi)含子順序,另外還包括編碼區(qū)前面及后面非翻譯順序。這些內(nèi)含子順序必須除支而把外顯子順序連接起來(lái),才能產(chǎn)生成熟的有功能的mRNA分子,這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為RNA剪接(RNa splicing)。剪切發(fā)生在外顯子的3‘末端的GT和內(nèi)含子3’末端與下一個(gè)外顯子交界的AG處。

加帽

幾乎全部的真核 mRNa 端都具“帽子”結(jié)構(gòu)。雖然真核生物的mRNA的轉(zhuǎn)錄以嘌呤核苷酸三磷酸(pppAG或pppG)領(lǐng)頭,但在5‘端的一個(gè)核苷酸總是7-甲基鳥(niǎo)核苷三磷酸(m7GpppAGpNp)。mNRA5’端的這種結(jié)構(gòu)稱(chēng)為帽子(cap)。不同真核生物的mRNA具有不同的帽子。 mRNA的帽結(jié)構(gòu)功能:

①能被核糖體小亞基識(shí)別,促使mRNA和核糖體的結(jié)合;

②m7Gppp結(jié)構(gòu)能有效地封閉RNa 5‘末端,以保護(hù)mRNA免疫5’核酸外切酶的降解,增強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定。

加尾

大多數(shù)真核生物的mRNA 3‘末端都有由100~200個(gè)A組成的Poly(A)尾巴。Poly(A)尾不是由DNA編碼的,而是轉(zhuǎn)錄后的前mRNA以ATP為前體,由RNA末端腺苷酸轉(zhuǎn)移酶,即Ploy(A)聚合酶催化聚合到3’末端。加尾并非加在轉(zhuǎn)錄終止的3‘末端,而是在轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的3’末端,由一個(gè)特異性酶識(shí)別切點(diǎn)上游方向13~20堿基的加尾識(shí)別信號(hào)AAUAAA以及切點(diǎn)下游的保守順序GUGUGUG,把切點(diǎn)下游的一段切除,然后再由Poly(A)聚合酶催化,加上Poly(A)尾巴,如果這一識(shí)別信號(hào)發(fā)生突變,則切除作用和多聚腺苷酸化作用均顯著降低。mRNAPoly(A)尾的功能是:

①可能有助mRNA從核到細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn);

②避免在細(xì)胞中受到核酶降解,增強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定性。

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