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闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柟闂寸绾剧懓顪冪€n亝鎹i柣顓炴閵嗘帒顫濋敐鍛闁诲氦顫夊ú蹇涘磿閹惰棄鐒垫い鎺戯功缁夌敻鏌嶈閸擄箓宕h箛鏇犵濞撴埃鍋撻柣娑卞櫍楠炴帡骞婇搹顐b拻闁逞屽墾缂嶅棝宕滃☉銏犵厽闁靛牆鎳夐弨浠嬫煟濮楀棗鏋涢柣蹇涗憾閺屾盯鍩¢崒婊冣拰閻庤娲樼换鍫濐嚕娴犲鏁囬柣鎰暜缁鳖噣姊洪懡銈呅俊妞煎妿閹峰啴鏁冮崒娑樹簻闂佺硶鍓濈粙鎺楁偂閻樼粯鐓欓梻鍌氼嚟閸斿秵绻涢幊宄板暊閺€鑺ャ亜閺冨洤浜瑰褝绠撻弻锛勪沪閸撗佲偓鎺楁煃瑜滈崜銊х礊閸℃ḿ顩查柛顐f礀绾惧潡鏌¢崘銊у闁绘挻鐩幃姗€鎮欓幓鎺嗘寖濠电偞褰冮悺銊╁Φ閸曨垰顫呴柍鈺佸暟椤︾増绻濈喊妯峰亾瀹曞洤鐓熼悗瑙勬磸閸旀垿銆佸▎鎾寸叆妞ゆ牗鐭竟鏇熶繆閵堝繒鍒伴柛鐕佸灦閸╂盯骞嬮敂鐣屽幈闂佹寧妫侀褔鐛弽顓熺厱婵☆垳绮紞鎴︽婢跺绡€濠电姴鍊搁弳鐔兼煕閳哄鎮奸柍褜鍓氶鏍窗閺嶎厸鈧箓鏌ㄧ€b晝绠氶梺褰掓?缁€浣告暜闂備線娼х换鍡椢i崨顓氱細闁哄啫鐗婇埛鎺懨归敐鍥ㄥ殌闁告柣鍊栫换娑氣偓娑櫭崫铏光偓瑙勬礃閸ㄥ灝鐣烽悢纰辨晬闁挎繂妫欏▍鍡涙⒒娴h姤纭堕柛锝忕畵楠炲繘鏁撻敓锟�8.7.10

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紅霉素軟膏的含量測(cè)定

紅霉素軟膏系由紅霉素和軟膏基質(zhì)加工制成的外用抗菌素,是目前臨床常用于膿皰瘡等化膿性皮膚病及小面積燒傷、潰瘍面的感染。中國(guó)藥典2000年版采用抗生素微生物檢定法測(cè)定其含量,該方法周期長(zhǎng),操作繁瑣,影響因素較多。本文介紹的高效液相色譜法,采用優(yōu)化的色譜條件,使紅霉素軟膏的含量測(cè)定操作簡(jiǎn)便,專屬性高,重現(xiàn)性好,可以替代微生物檢定法。

儀器與試藥

A gilent LC1100 高效液相色譜儀,A gilent LC1100 自動(dòng)進(jìn)器,A gilent LC1100 紫外檢測(cè)器,,依利特色譜柱(大連依利特科學(xué)儀器有限公司, 填料::sinoch rom ODS2BP 5Lm; 416mm ×250mm ) ,A gilent LC1100 數(shù)據(jù)處理儀。紅霉素對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所(批號(hào): 0307-9713) ;紅霉素軟膏3 批(批號(hào)031005、031216、040513) ,規(guī)格乙腈為色譜純;磷酸二氫銨、三乙胺為分析純,,水為超純水。

方法與結(jié)果

固定相:十八烷基硅烷鍵合硅膠;流動(dòng)相:011mol·L - 1磷酸二氫銨溶液(三乙胺調(diào)節(jié)pH615) 2乙腈(70:30) ;流速110m l·m in- 1;檢測(cè)波長(zhǎng)210nm;進(jìn)樣量20LL。在上述條件下,測(cè)得紅霉素對(duì)照品溶液色譜圖, 紅霉素的保留時(shí)間約為615m in,與雜質(zhì)峰的分離度均大于115 。

對(duì)照品溶液的制備

精密稱取紅霉素對(duì)照品325mg,置50mL量瓶中,加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度,搖勻,配成對(duì)照品貯備液,再精密量取2mL置25mL量瓶中,加流動(dòng)相配制成每1mL含紅霉素015mg的對(duì)照品溶液。

供試品溶液的制備

精密稱取樣品5g,置分液漏斗中,加石油醚80mL,緩緩振搖,使其質(zhì)溶解,用磷酸鹽緩沖液(pH615)提取4次,每次約25mL,合并提取液,置100mL量瓶中,用磷酸鹽緩沖液(pH615)稀釋至刻度,搖勻,配制成每1mL含紅霉素015mg的供試品溶液。

線性關(guān)系

分別精密量取上述對(duì)照品貯備液015、110、210、410、810、1210、1610mL至25mL量瓶中,加流動(dòng)相至刻度。分別進(jìn)樣20LL ,記錄色譜圖。以峰面積(Y) 對(duì)進(jìn)樣量(X)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為::Y= 32798+ 95934X, r= 019999。結(jié)果表明,紅霉素在進(jìn)樣量310~ 80Lg 的范圍內(nèi),峰面積與進(jìn)樣量之間呈良好的線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)

取試驗(yàn)用對(duì)照品溶液,重復(fù)進(jìn)樣5 次,記錄色譜峰面積, RSD 為0155%。溶液穩(wěn)定性

取試驗(yàn)用供試品溶液在室溫放置,分別于0、1、3、5h取20LL 進(jìn)樣,記錄色譜峰面積,RSD 為0113%。

結(jié)果討論

檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

取紅霉素對(duì)照品用流動(dòng)相溶解并制成每1mL中含015mg的溶液,在190nm~300nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描,在210nm的波長(zhǎng)處有最大吸收,因此選擇210nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。流動(dòng)相的選擇

在實(shí)驗(yàn)過程中,選擇不同鹽濃度和不同pH值的流動(dòng)相進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)鹽濃度的增加可改善紅霉素與有關(guān)物質(zhì)的分離度,流動(dòng)相pH值的提高也可改善紅霉素與有關(guān)物質(zhì)的分離度,考慮到對(duì)色譜柱的損耗。故選用用011mol·L-1磷酸二氫館溶液(三乙胺調(diào)節(jié)pH615)2乙腈(70∶30)作為流動(dòng)相。

用HPLC法測(cè)定紅霉素的含量,準(zhǔn)確性及重現(xiàn)性均較好,且操作簡(jiǎn)便,HPLC法與微生物檢定法進(jìn)行比較,測(cè)定結(jié)果基本一致,因此可以用HPLC法替代微生物檢定法測(cè)定紅霉素含量。

醫(yī)師資格考試公眾號(hào)

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