方法名稱(chēng)：

頭孢地尼原料藥－頭孢地尼－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定頭孢地尼原料藥中頭孢地尼的含量。

本方法適用于頭孢地尼原料藥。

方法原理：

供試品加磷酸鹽緩沖液溶解再加流動(dòng)相稀釋?zhuān)M(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)頭孢地尼的峰面積，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 乙腈

2. 甲醇

3. 0.25%四甲基氫氧化銨溶液

4. 磷酸

5. 乙二胺四醋酸二鈉溶液（0.1mol/L）

6. pH7.0磷酸鹽緩沖液

儀器設(shè)備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按頭孢地尼峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：0.25%四甲基氫氧化銨溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值為5.5） 乙腈 甲醇=900 60 40，加入0.1mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液0.4mL

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. pH7.0磷酸鹽緩沖液

稱(chēng)取無(wú)水磷酸氫二鈉42.59g、磷酸二氫鉀27.22g，加水溶解并稀釋至1000mL。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取頭孢地尼對(duì)照品約20mg，置100mL棕色量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（pH7.0）溶解后用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即為對(duì)照品溶液。

3.供試品溶液的制備

精密稱(chēng)取供試品約20mg，置100mL棕色量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（pH7.0）溶解后用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定頭孢地尼（C14H13N5O5S2）的峰面積，計(jì)算出其含量

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.135