方法名稱(chēng)： 利血平注射液—利血平的測(cè)定—分光光度法

應(yīng)用范圍： 本方法采用分光光度法測(cè)定利血平注射液中利血平的含量。

本方法適用于利血平注射液。

方法原理： 供試品加2%枸櫞酸溶液稀釋?zhuān)萌燃淄檎駬u提取，1%碳酸氫鈉溶液洗滌，再用甲醇稀釋制成供試液，經(jīng)前處理置紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，于390nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 三氯甲烷

2. 無(wú)水乙醇

3. 2%枸櫞酸溶液

4. 1%碳酸氫鈉溶液

5. 甲醇

6. 0.3%亞硝酸鈉溶液的50%甲醇溶液

7. 5%氨基磺酸銨溶液

8. 50%甲醇溶液

儀器設(shè)備： 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

試樣制備： 1.對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取利血平對(duì)照品25mg，置100mL量瓶中，加三氯甲烷3~4mL使溶解，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液，精密量取2mL，置25mL量瓶中，加三氯甲烷18mL，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密量取供試品適量（約相當(dāng)于利血平5mg），置100mL量瓶中，加2%枸櫞酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，置分液漏斗中，用三氯甲烷振搖提取3次（第一次6mL、第二、三次各5mL），每次振搖2分鐘，分取三氯甲烷液，分別用同一1%碳酸氫鈉溶液10mL振搖洗滌，分取三氯甲烷層置干燥的25mL量瓶中，水層再用三氯甲烷2mL提取1次，提取液并入量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至稱(chēng)取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5mL，分別置10mL量瓶中，各加甲醇2mL、新制的0.3%亞硝酸鈉溶液的50%甲醇溶液1.0mL與鹽酸5滴，搖勻放置30分鐘，各加新制的5%氨基磺酸銨溶液0.50mL，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，另取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5mL，除以50%甲醇溶液1.0mL代替新制的0.3%亞硝酸鈉溶液的50%甲醇溶液外，分別用同一方法處理后作為各自相應(yīng)的空白，照紫外分光光度法，于波長(zhǎng)390nm處測(cè)定吸收度。

注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對(duì)照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計(jì)算含量。