一、藥劑衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

　　藥劑作為直接應(yīng)用于人體的特殊商品對衛(wèi)生學(xué)有著較高的要求。藥劑被微生物污染，可能會使其變質(zhì)、腐敗，甚至失效；也有可能危害人體。因此，各國GMP對藥品衛(wèi)生都做了嚴(yán)格規(guī)定，以保證藥品能安全、有效地應(yīng)用于臨床。

　?。ㄒ唬┲兴幩幤沸l(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

　　1.致病菌與活螨

　　口服藥品每克或每毫升不得檢出大腸桿菌，含動物藥及臟器的藥品同時不得檢出沙門菌。不得檢出活螨。外用藥品每克或每毫升不得檢出綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌；陰道、創(chuàng)傷、潰瘍用制劑不得檢出破傷風(fēng)桿菌。

　　2.細(xì)菌和霉菌

　　（1）口服固體制劑

　?、俨缓幵鄣闹苿┟靠撕?xì)菌數(shù)不得過1000個，霉菌數(shù)不得過l00個。

　?、诤幵鄣闹苿┟靠撕?xì)菌數(shù)，片劑、顆粒劑不得超過1醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理萬個，丸劑不得過5萬個，每克含霉菌數(shù)不得過500個。全部生藥粉末分裝的硬膠囊劑，不得過5萬個；散劑，不得過l萬個。霉菌數(shù)均不得過500個。

　?。?）口服液體制劑 每毫升含細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)和酵母菌數(shù)均不得過l00個。

　　（3）外用藥品

　?、傺劭朴盟幟靠嘶蛎亢辽?xì)菌數(shù)不得過l00個，不得檢出霉菌和酵母菌。

　?、陉幍?、創(chuàng)傷、潰瘍用制劑，每克或每毫升含細(xì)菌數(shù)不得過l000個，霉菌數(shù)不得過l00個。

　?、塾糜谕暾砥ぁつさ暮幉脑鄣闹苿?。每克含細(xì)菌數(shù)不得過5萬個，霉菌數(shù)不得過500個。

　?。?）氣霧劑和膜劑

　?、倌┘?xì)菌數(shù)及霉菌數(shù)每lOcm2不得過100個。

　?、跉忪F劑每毫升細(xì)菌數(shù)及霉菌數(shù)不得過100個。

　　（5）暫不進(jìn)行限度要求的藥品

　?、俨缓幉脑鄣母鄤?，如狗皮膏、拔毒膏等。

　?、诤刽⑸袂劝l(fā)酵類藥材原粉的中藥制劑。

　?。ǘ┲兴幹扑庍^程的污染途徑

　　1.原料藥材

　　主要指植物類和動物類藥材，直接攜帶多種微生物和螨，且很多藥材（如含糖量較高的根莖類藥材和脂肪較多的動物類藥材）有利于微生物和螨的生長繁殖。

　　2.輔料

　　如水、蜂蜜、淀粉等常用輔料均存在一定數(shù)量的微生物。

　　3.制藥設(shè)備

　　如粉碎機(jī)、混合機(jī)、制丸機(jī)、壓片機(jī)及各種盛裝物料的料桶和器具等均有可能帶入微生物。

　　4.環(huán)境空氣

　　空氣中有多種微生物存在。

　　5.操作人員

　　工人的手、外表皮膚、毛發(fā)及穿戴的鞋、帽和衣服上都帶有微生物。

　　6.包裝材料

　　玻璃瓶、塑料袋、包裝紙等可能帶入微生物。

　　二、制藥環(huán)境的衛(wèi)生管理

　　我國GMP對藥品生產(chǎn)企業(yè)所處環(huán)境的空氣、場地、水質(zhì)等衛(wèi)生條件均有嚴(yán)格要求。

　　由于空氣中的細(xì)菌多附著于5μm以上的塵粒上，因此制藥車間凈化空氣除去塵粒，也就可有效地除去微生物。

　　（一）潔凈室的等級及適用范圍

　　關(guān)于潔凈室的等級標(biāo)準(zhǔn)與要求見下表：

　　潔凈室標(biāo)準(zhǔn)（1998年修訂）：

　　制藥廠的生產(chǎn)車間，根據(jù)潔凈度的不同，可分為控制區(qū)和潔凈區(qū)?？刂茀^(qū)一般要求達(dá)到10萬級標(biāo)準(zhǔn)，而潔凈區(qū)要求達(dá)到1萬級或100級標(biāo)準(zhǔn)。

　?。ǘ┛諝鉂崈艏夹g(shù)與應(yīng)用

　　空氣潔凈技術(shù)是指能創(chuàng)造潔凈空氣環(huán)境的各種技術(shù)。大氣中懸浮著大量的灰塵，纖維、毛發(fā)、花粉、細(xì)菌、孢子等微粒。中藥制藥生產(chǎn)場所采取空氣潔凈技術(shù)，可有效地控制空氣中的塵粒濃度，降低細(xì)菌的污染。目前，常用的空氣潔凈技術(shù)為層流潔凈技術(shù)，它的氣流動形式為層流。根據(jù)氣流方向分為水平層流潔凈室和垂直層流潔凈室。

　?。ㄈ┎煌瑑艋墑e的適用范圍

　　100級潔凈區(qū)適用于：①不能在最后容器中滅菌的無菌制劑的配液與灌封；②能在最后容器中滅菌的大體積（＞50ml時）注射用藥品的濾過、灌封；粉針劑的分裝、壓塞；無菌制劑、粉針劑原料藥的精制、烘干、分裝。

　　1萬級潔凈區(qū)適用于：①需除菌濾過但不能在最后容器中滅菌的無菌制劑的配液；②能在最后容器中滅菌的大體積注射用藥品的配液及小體積（＜50ml）注射用藥品的配液、濾過、灌封；③滴眼液的配液、濾過、灌封；④不能熱壓滅菌的口服液的配液、濾過、灌封；⑤不能在最后容器中滅菌的油膏、霜膏、懸浮液、乳化液等藥劑的制備和灌封；⑥注射用藥品原料藥的精制、烘干、分裝。

　　10萬級的控制區(qū)一般適用于；①片劑、膠囊劑、丸劑及其他制劑的生產(chǎn)；②口服和外用原料藥的精制、烘干、分裝。

　　三、滅菌方法與無菌操作

　　滅菌法是指殺死或除去所有微生物及其芽孢的方法。

　　與滅菌方法相關(guān)的操作包括：①滅菌：是指用物理或化學(xué)方法將所有致病菌和非致病的微生物、細(xì)菌的芽孢全部殺死的操作；②防腐（抑菌）：是指用物理或化學(xué)方法防止和抑制微生物生長繁殖的操作；③消毒：是指用物理或化學(xué)方法將病原微生物殺死的操作。

　?。ㄒ唬┪锢頊缇?

　　物理滅菌法系指采用物理因素如溫度、聲波、輻射等達(dá)到滅菌目的的方法。加熱可破壞微生物中的酶、蛋白質(zhì)和核酸，導(dǎo)致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下，濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好，是因為：①濕熱滅菌時，有水分存在，蛋白質(zhì)易變性；②濕熱的穿透力比干熱大；③濕熱有潛熱（汽化熱）。

　　1.干熱滅菌法

　　常用的有火焰滅菌法與干熱空氣滅菌法兩種。

　　（1）火焰滅菌法 系指用火焰直接燒灼以達(dá)到滅菌的方法。將手術(shù)刀、鑷子、藥刀等通過火焰幾秒鐘即可。

　?。?）干熱空氣滅菌法 系指利用高溫干熱空氣達(dá)到滅菌的方法。一般需160℃～170℃維持2h以上。本法適用于玻璃器皿、搪瓷容器及油性和惰性輔料，如液體石蠟、油類、脂肪類、滑石粉、活性炭等。

　　2.濕熱滅菌法

　　本法是利用飽和水蒸氣或沸水進(jìn)行殺滅菌的方法。

　?。?）熱壓滅菌法本法系在熱壓滅菌器內(nèi)，利用高壓飽和水蒸氣殺滅微生物的方法。該法是最可靠的滅菌方法。但滅菌應(yīng)以保證藥物不被破壞失效為前提，所以很多藥劑不宜采用熱壓滅菌。熱壓滅菌法所需的溫度及與溫度相當(dāng)?shù)膲毫蜁r間，見下表。

　　常用的熱壓滅菌器有小型的手提式熱壓滅菌器、大型的臥式熱壓滅菌器等。熱壓滅菌法適用于耐熱藥物及其水溶液、手術(shù)器械及用具等物品的滅菌。熱壓滅菌器使用時應(yīng)注意以下問題。①檢查儀表：使用前應(yīng)先檢查壓力表、溫度表、安全閥等部件。②排盡空氣：飽和水蒸氣滅菌效力強(qiáng)于濕飽和蒸汽和過熱蒸汽。為保證飽和蒸汽的獲得，首先開啟放氣閥門將滅菌器內(nèi)空氣排盡，使壓力與溫度相符。③準(zhǔn)確記時：一般先預(yù)熱l5～20min，再升壓和升溫，達(dá)到預(yù)定壓力和溫度后開始計時。④滅菌完畢后，停止加熱，待壓力表指針降至零，打開放氣閥，排盡器內(nèi)蒸氣，待溫度降至40℃以下，再緩緩開啟門蓋。不可快速放氣，驟然減壓會導(dǎo)致容器爆裂和藥液外溢。

　?。?）流通蒸氣滅菌法和煮沸滅菌法 系指在常壓下用100℃的水蒸氣或用水煮沸以殺滅微生物的方法。滅菌時間一般為30～60min，可殺滅繁殖型細(xì)菌，但不一定能完全殺滅芽孢。適于含有抑菌劑藥液的滅菌、1～2ml的注射劑及耐熱品種的滅菌。

　?。?）低溫間歇滅菌法 系指將待滅菌的物品先在60℃～80℃加熱1h以殺死細(xì)菌繁殖體。然后再室溫或孵箱保溫24h，以使芽孢發(fā)育成繁殖體，再進(jìn)行加熱將其殺滅。如此操作三次以上，至全部滅菌。此法適于必須采用加熱滅菌但又不耐高溫的藥品。應(yīng)用本法滅菌的制劑，需添加適量的抑菌劑。

　　3.紫外線滅菌法

　　紫外燈產(chǎn)生紫外線，其中波長254～257nm的紫外線殺菌力最強(qiáng)。紫外線可使微生物核酸蛋白變性死亡，同時空氣受紫外線輻射后產(chǎn)生微量臭氧也起滅菌作用。由于紫外線穿透能力很差，所以紫外線滅菌法僅適于表面和空氣的滅菌。紫外線滅菌的適宜溫度在10℃～55℃，相對濕度為45%～60%。

　　4.輻射滅菌法

　　輻射滅菌是應(yīng)用γ射線殺滅細(xì)菌的方法。常用60Co輻射源放射γ射線殺菌，被滅菌物品溫度僅有幾度的變化，其滅菌的機(jī)理是γ射線直接作用于微生物的蛋白質(zhì)、核酸和酶等，促使化學(xué)鍵斷裂，殺死微生物；又可間接作用于微生物體內(nèi)的水分子，引起水的電離和激發(fā)，生成自由基，再作用于微生物活性分子，使微生物死亡。由于γ射線穿透力極強(qiáng)，可用于密封和整箱已包裝的藥物的滅菌。滅菌效果可靠。一般認(rèn)為中成藥用l0千格瑞（KGY）以下劑量輻射均能達(dá)到衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求。

　?。ǘV過除菌法

　　濾過除菌法系指使藥液通過除菌濾器中的適宜濾材，以物理阻留的方法濾除活的或死的細(xì)菌，以達(dá)到除菌目的方法。一般繁殖型微生物大小約l.0μm，芽孢約為0.5μm。一般濾材孔徑須在0.2μm以下，才可有效地阻擋微生物及芽孢的通過。濾過除菌法適于不耐熱的低黏度藥物溶液，尤其是一些生化制劑。在除菌過程中，同時還可除去一些微粒雜質(zhì)。本法必須配合無菌操作技術(shù)，成品必須經(jīng)無菌檢查合格后方可出廠。常用的濾器有垂熔玻璃濾器和微孔濾膜濾器。一般藥液先經(jīng)粗濾、精濾（砂濾棒，多孔聚乙烯、聚氯乙烯濾器，白陶土濾器，G4、G5垂熔玻璃濾器，0.45μm左右的微孔濾膜）后，在無菌環(huán)境下，再用已滅菌的G6垂熔玻璃濾器或0.22μm以下微孔濾膜濾除細(xì)菌。

　　（三）化學(xué)滅菌法

　　化學(xué)滅菌法系指用化學(xué)藥品來殺滅微生物的方法。同一種化學(xué)藥品在低濃度時呈現(xiàn)抑菌作用，而在高濃度時則能起殺菌作用。其殺菌機(jī)理可能是：能使微生物蛋白質(zhì)變性死亡，或與酶系統(tǒng)結(jié)合影響代謝，或改變膜壁通透性使微生物死亡等。常用的方法有消毒劑消毒法和化學(xué)氣體滅菌法等。

　　1.浸泡和表面消毒法

　　消毒是指殺死病原微生物的方法。但化學(xué)消毒劑大多僅能殺死微生物的繁殖體而不能殺死芽孢，能控制一定范圍的無菌狀態(tài)。可將消毒劑配成適宜濃度，采用噴淋、涂擦或浸泡等方法對物料、環(huán)境、器具等進(jìn)行消毒。常用的化學(xué)消毒劑有0.1%～0.2%潔爾滅、新潔爾滅溶液、2%～5%的酚或煤酚皂溶液、75%乙醇等。常用于物體表面滅菌。但要注意其濃度不要過高，以防止化學(xué)腐蝕作用。

　　2.氣體滅菌法

　　系指利用能形成氣體或產(chǎn)生蒸氣的化學(xué)藥品達(dá)到滅菌目的的方法。

　?。?）環(huán)氧乙烷滅菌法 環(huán)氧乙烷室溫下為氣體，其分子作用于菌體后，能與菌體蛋白、核酸和酶中的-COOH、-NH2、-SH等基團(tuán)起反應(yīng)，而使菌體死亡。環(huán)氧乙烷分子易穿透塑料、紙板或固體粉末，因此可用于塑料包裝的原料粉末、散劑、顆粒等固體藥料及其他固體器具的滅菌。環(huán)氧乙烷具有可燃性，與空氣混合時，當(dāng)空氣含量達(dá)3.O%（V／V）即可爆炸，應(yīng)用時需用二氧化碳或氟里昂稀釋。環(huán)氧乙烷對皮膚、眼、黏膜有損害，可產(chǎn)生水皰或結(jié)膜炎，應(yīng)用時應(yīng)注意防護(hù)。

　?。?）蒸氣熏蒸滅菌法 采用甲醛、丙二醇或乳酸等化學(xué)品，通過加熱產(chǎn)生蒸氣進(jìn)行空氣環(huán)境滅菌。

　　（四）無菌操作法

　　系指藥劑生產(chǎn)的整個過程均控制在無菌條件下進(jìn)行的操作方法。某些藥物若采用加熱等方法滅菌則導(dǎo)致成分分解失效；為保證注射劑滅菌效果，避免污染，應(yīng)采用無菌操作。無菌操作室應(yīng)達(dá)到GMP的規(guī)定，為達(dá)到無菌要求可采取綜合措施：①應(yīng)采用層流潔凈空氣技術(shù)，大量無菌制劑生產(chǎn)在無菌潔凈室內(nèi)進(jìn)行，小量無菌制劑的制備，采用層流潔凈工作臺；②用甲醛等蒸氣熏蒸法消毒和紫外燈滅菌法進(jìn)行空氣環(huán)境滅菌；③室內(nèi)用具、墻、桌等暴露面用消毒劑噴、擦消毒；④其他物品可熱壓或干熱法滅菌；⑤操作人員衣、帽、鞋、手等應(yīng)消毒及滅菌。

　　四、藥劑的防腐與防腐劑

　　微生物有水分及其他適宜條件就可繁殖，即使像含較少水分的蜜丸，由于含較多蜂蜜，也易使霉菌繁殖超標(biāo)。固體藥劑所含水分較少，不利微生物繁殖，只要采用適宜滅菌方法就可達(dá)滅菌目的，而液體藥劑則易被微生物污染，所以除采用適當(dāng)方式滅菌外，可加防腐劑以抑制微生物繁殖。

　　防腐劑，又稱抑菌劑，系指能抑制微生物生長繁殖的化學(xué)藥品。

　　常用的防腐劑如下：

　　1.苯甲酸與苯甲酸鈉

　　為常用的有效防腐劑，一般用量為0.01%～0.25%。苯甲酸水溶性較差，而苯甲酸鈉水溶性好，易溶解，應(yīng)用方便。但由于防腐機(jī)制是其分子型的苯甲酸透入菌體膜壁而起效，所以不論使用苯甲酸或苯甲酸鈉，均宜在醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理pH4以下的藥液中使用。使之絕大部分以分子型存在，故防腐效力較好。若pH值升高，則應(yīng)加大用量。如pH＞5時用量不得少于0.5%。

　　2.對羥基苯甲酸酯類

　　對羥基苯甲酸酯類（尼泊金類）有甲、乙、丙、丁四種酯，抑霉菌作用較強(qiáng)，一般用量為0.01%～0.25%。在酸性、中性及弱堿性藥液中均有效。但隨著pH值的升高，在堿性藥液中，由于酚羥基的解離及酯的水解而使尼泊金防腐力下降。聚山梨酯類與其發(fā)生絡(luò)合作用，可減弱其防腐效力，應(yīng)適當(dāng)增加其用量。各種酯單用即可，幾種酯合用有協(xié)同作用。由于酯類在水中溶解度較小，可先用熱水將尼泊金攪拌使之溶解后加入；或取尼泊金先溶于少量乙醇中，再邊加邊攪，加入藥液中。

　　3.山梨酸（鉀）

　　常用濃度為0.15%～0.2%。對細(xì)菌和霉菌均有較強(qiáng)的抑菌效力。特別適用于含有聚山梨酯類液體藥劑的防腐。

　　4.其他

　　20%以上的乙醇、30%以上的甘油也具有防腐作用，此外注射劑（肌肉或皮下注射用）中常加甲酚、苯甲醇等作抑菌劑用。