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消毒與滅菌的方法可分為物理方法和化學(xué)方法兩大類。常用以下術(shù)語表示物理或化學(xué)方法對微生物的殺滅程度:
滅菌:指殺滅或去除物體上所有微生物的方法,包括抵抗力極強的細菌芽胞。
消毒:指殺死物體上病原微生物的方法,芽胞或非病原微生物可能仍存活。用以消毒的藥品稱為消毒劑。
防腐:防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法。
無菌:指沒有活菌的意思。防止細菌進入人體或其他物品的操作技術(shù),稱為無菌操作。
一、熱力滅菌法的種類及其應(yīng)用
物理消毒滅菌的方法主要有熱力法、射線法和過濾法三種。超聲波、干燥、冷凍也能殺菌抑菌。
熱力滅菌法是利用熱能去變性蛋白質(zhì)或核酸、破壞細胞膜或胞膜來實現(xiàn)殺死微生物。分干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。
干熱滅菌的方法有:①焚燒:適用于廢棄物品或動物尸體等;②燒灼:適用于實驗室的金屬器械(鑷、剪、接種環(huán)等)、玻璃試管口和瓶口等的滅菌;③干烤:在干烤箱內(nèi)加熱至160~170℃維持2小時,可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物。適用于耐高溫的玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等;④紅外線:常用于碗、筷等食具的滅菌;⑤微波:波長為1~1000mm的電磁波可穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì),滅菌效果不可靠,用于非金屬器械及食具消毒。
濕熱滅菌法可在較低的溫度下達到與干熱法相同的滅菌效果,因為:①濕熱中蛋白吸收水分,更易凝固變性;②水分子的穿透力比空氣大,更易均勻傳遞熱能;③蒸汽有潛熱存在,每1克水由氣態(tài)變成液態(tài)可釋放出529卡熱能,可迅速提高物體的溫度。常用的濕熱滅菌法有:
(一)巴氏消毒法
加熱61.1~62.8℃30分鐘,或者72℃15秒,可殺死乳制品的鏈球菌、沙門菌、布魯菌等病原菌,但仍保持其中不耐熱成分不被破壞,用于乳制品消毒。
(二)煮沸法
繁殖體需100%5分鐘以上,芽胞需2小時以上,常用于食具、刀剪、注射器的消毒。
(三)流通蒸汽消毒法
在一個大氣壓下利用100℃的水蒸氣進行消毒,15~30分鐘可殺滅細菌繁殖體,但不保證殺滅芽胞。
(四)間歇滅菌法
利用反復(fù)多次的流通蒸汽加熱,殺滅所有微生物,包括芽胞。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。
(五)高壓蒸汽滅菌法
可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物,是滅菌效果最好、應(yīng)用最廣的滅菌方法。方法是將需滅菌的物品放在高壓鍋內(nèi),加熱至103.4kPa(1.05kg/cm2)蒸汽壓下,溫度達到121.3℃,維持15~20分鐘。適用于普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的滅菌。
二、紫外線消毒的原理和應(yīng)用
常用的射線是紫外線和電離輻射:①紫外線:波長200~300nm的紫外線(包括日光中的紫外線)具有殺菌作用,以250~260nm最強。原理是紫外線可使DNA鏈上相鄰的兩個胸腺嘧啶共價結(jié)合而形成二聚體,阻礙DNA正常轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致微生物的變異或死亡。紫外線穿透力較弱,一般用于手術(shù)室、病房、實驗室的空氣消毒。紫外線可損傷皮膚和角膜,應(yīng)注意防護。
電離輻射包括γ射線、x射線和加速電子等,對各種微生物均有致死作用,細菌繁殖體對射線比芽胞要敏感,用于一次性醫(yī)用塑料制品批量滅菌。
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