APP下載

掃一掃,立即下載

醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)APP下載

開(kāi)發(fā)者:1

蘋(píng)果版本:1

安卓版本:1

應(yīng)用涉及權(quán)限:查看權(quán)限 >

APP:隱私政策:查看政策 >

微 信
醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)微信公號(hào)

官方微信Yishimed66

24小時(shí)客服電話(huà):010-82311666
您的位置:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng) > 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)理論 > 微生物學(xué) > 正文

丙型肝炎病毒微生物學(xué)診斷

熱點(diǎn)推薦

——●●●聚焦熱點(diǎn)●●●——
報(bào)名預(yù)約>> 有問(wèn)必答>> 報(bào)考測(cè)評(píng)>>

丙型肝炎病毒微生物學(xué)診斷

放射免疫診斷(RIA)或酶聯(lián)免疫試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清中抗HCV

1989年,Kuo等建立了抗-C-100放射免疫試驗(yàn)方法(RIA),隨后Ortho公司又研制成功酶聯(lián)免疫試驗(yàn)方法(ELISA)檢測(cè)抗-C-100。這兩種方法均用重組酵母表達(dá)的病毒抗原(C-100-3,為NS4編碼的蛋白,含363個(gè)氨基酸),經(jīng)純化后包被微量塑料板孔,然后加被檢血清,該病毒抗原即與被檢血清中抗-C-100結(jié)合,最后加同位素或酶標(biāo)記的鼠抗人lgG單克隆抗體,加底物顯色判斷結(jié)果。

用上述酶聯(lián)免疫試驗(yàn)法(ELISA)檢測(cè)抗-C-100有如下缺點(diǎn):1. 抗-C-100出現(xiàn)較晚,約半數(shù)輸血后丙型肝炎病人于輸血后4~6個(gè)月抗—C-100首次陽(yáng)轉(zhuǎn),因此,不宜作為急性丙型肝炎的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室診斷;2.抗-C-100不是中和抗體,也不是lgM抗體,而是lgG 抗體; 3.本法不夠靈敏,少數(shù)丙型肝炎病人檢測(cè)不到抗-C-100;4.有非特異性,一些自家免疫性慢性肝病患者可出現(xiàn)假陽(yáng)性,因此,抗HCV陽(yáng)性需作重組免疫印跡試驗(yàn)(Recombinant Immune BlotAssay, RIBA, 或稱(chēng) Western Blot)證實(shí)。

由于HCV核心抗體出現(xiàn)較早,因此,最近美國(guó)第二代酶聯(lián)免疫試驗(yàn)法(ELISA)檢測(cè)抗HCV。該試劑盒采用HCVC區(qū)編碼蛋白C-22-3和非結(jié)構(gòu)區(qū)NS3編碼蛋白C-33-3和C-100-3包被載體。用本法檢測(cè)抗HCV,其檢出率可提高25~30%,且檢出抗HDV的時(shí)間也可提早16~42天。

(二)HDV cDNA/聚合酶鏈反應(yīng)(HCV cDNA/Polymerase Chain Reaction,RTPCR)測(cè)定肝和血清中HCV RNA。

本法是將HDV RNA逆轉(zhuǎn)錄為HCV DNA,選用高度保守的5′非編碼區(qū)引物擴(kuò)增放大后作電泳觀察結(jié)果。本法較靈敏。由于肝和血清中HCv RNA出現(xiàn)較抗-HCV為早,一些HCV感染者抗HCV尚未陽(yáng)轉(zhuǎn)時(shí),其肝和血清中已可測(cè)到HDv RNA。HCV RNA陽(yáng)性,說(shuō)明病毒在體內(nèi)復(fù)制;HCV RNA陰轉(zhuǎn),說(shuō)明病毒被清除。因此,RT-PCR可作為丙型肝炎的早期診斷和獻(xiàn)血員篩查的出現(xiàn)指標(biāo),也可作為丙型肝炎預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)。

(三)免疫組化法檢測(cè)肝組織中HCV抗原

感染HCV的黑猩猩或病人血清中提取lgG,用間接免疫熒光或間接免疫酶組化法檢測(cè)肝內(nèi)HCV抗原。

醫(yī)師資格考試公眾號(hào)

編輯推薦
    • 免費(fèi)試聽(tīng)
    • 免費(fèi)直播
    湯以恒 臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師 《消化系統(tǒng)》 免費(fèi)試聽(tīng)
    免費(fèi)資料
    醫(yī)師資格考試 備考資料包
    歷年考點(diǎn)
    應(yīng)試指導(dǎo)
    仿真試卷
    思維導(dǎo)圖
    立即領(lǐng)取
    回到頂部
    折疊