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支原體實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法,相信朋友們都想知道,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理相關(guān)知識(shí)點(diǎn),供朋友們參考。
支原體實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法有:形態(tài)學(xué)檢查、支原體培養(yǎng)、抗原檢測(cè)、血清學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。解脲支原體MB抗原的研究表明:MB抗原是解脲支原體感染時(shí)被識(shí)別的主要外膜抗原,具有種特異性,包含血清特異的和交叉反應(yīng)的抗原決定簇。編碼MB抗原的基因長(zhǎng)1200多個(gè)堿基、N端1/3為保守區(qū),包含群特異的抗原決定簇:C端2/3是由重復(fù)序列組成的可變區(qū),包含型特異的抗原決定簇,對(duì)該抗原的研究及對(duì)于研究疾病的發(fā)病機(jī)制和免疫機(jī)制起重要作用。MB抗原位于解脲支原體膜的表面,N端固定于膜上使C端重復(fù)區(qū)暴露于微生物周圍的微環(huán)境。N端可以作為其分群分型的基礎(chǔ),C端最可能首先與宿主的防御系統(tǒng)相遇而引起主要的抗體反應(yīng),是理解它的發(fā)病機(jī)制和免疫機(jī)制的基礎(chǔ)。MB抗原與疾病的關(guān)系,以及它在疾病中的作用還有待進(jìn)一步探討。
測(cè)定支原體抗體的血清學(xué)試驗(yàn)方法中,有支原體特異性血清學(xué)檢測(cè)和非特異性血清學(xué)檢測(cè):支原體特異性血清學(xué)檢測(cè)方法中,最常用的是補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn),另有間接免疫熒光染色檢查法、生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)、代謝抑制試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)、酶免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)等。支原體的非特異血清學(xué)方法有肺炎支原體冷凝集試驗(yàn)與MG鏈球菌凝集試驗(yàn),對(duì)支原體肺炎能起輔助診斷的作用。檢測(cè)特異性抗體IgG的方法尚不能達(dá)到早期快速診斷的目的,抗原的檢測(cè)為今后研究的發(fā)展方向。目前已有用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、熒光標(biāo)記抗體、肺炎支原體膜蛋白單克隆抗體和反向間接血凝法直接檢測(cè)分泌物和體液中支原體抗原的報(bào)道,具有很高的特異度和靈敏度。人體感染肺炎支原體后,能產(chǎn)生特異性IgM和IgG類抗體。IgM類抗體出現(xiàn)早,一般在感染后1周出現(xiàn),3~4周達(dá)高峰,以后逐漸降低。由于肺炎支原體感染的潛伏期為2~3周,當(dāng)患者出現(xiàn)癥狀而就診時(shí),IgM抗體已達(dá)到相當(dāng)高的水平,因此IgM抗體陽性可作為急性期感染的診斷指標(biāo)。如IgM抗體陰性,則不能否定肺炎支原體感染, 需檢測(cè)IgG抗體。IgG較IgM出現(xiàn)晚,需動(dòng)態(tài)觀察,如顯著升高提示近期感染,顯著降低說明處于感染后期。 ?PCR技術(shù)檢測(cè)為進(jìn)一步早期診斷MP感染提供可能。應(yīng)用PCR的敏感性和探針雜交的特異性合二為一,是目前公認(rèn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性最好的檢測(cè)。
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