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流感嗜血桿菌知識(shí)匯總-檢驗(yàn)士資料

2015-08-07 10:56 來(lái)源:
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流感嗜血桿菌知識(shí)匯總-檢驗(yàn)士資料:

生物學(xué)性狀:

流感嗜血桿菌,簡(jiǎn)稱(chēng)流感桿菌。

(1)形態(tài)與染色:急性感染標(biāo)本上,如腦脊液中多為短小球桿菌醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)|搜集整理,恢復(fù)期病灶或長(zhǎng)期人工傳代培養(yǎng)后可呈球桿狀、長(zhǎng)稈狀、絲狀等多形態(tài)性。

毒力株(黏液型菌株)在營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上,6-8小時(shí)有明顯莢膜,在陳舊培養(yǎng)物中莢膜消失。

無(wú)鞭毛,無(wú)芽孢。革蘭染色陰性,但著色較淺。用苯酚復(fù)紅或亞甲蘭單染色,呈現(xiàn)兩端濃染現(xiàn)象。

(2)培養(yǎng)特性:需氧菌。最適生長(zhǎng)溫度為35℃,最適pH為7.6-7.8.初次分離培養(yǎng)最好在5%-10%CO2環(huán)境中,以促進(jìn)其生長(zhǎng)。

在普通培養(yǎng)基中需加入X和V因子才能生長(zhǎng)。血液中的V因子通常處于抑制狀態(tài),經(jīng)80-90℃加熱10分鐘,使V因子釋放,故流感嗜血桿菌在加熱血平板上生長(zhǎng)良好,培養(yǎng)18-24小時(shí)后生長(zhǎng)直徑為0.5-0.8mm、圓形、光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊,呈露滴狀的小菌落。48小時(shí)后可形成直徑1.0-1.5mm灰白色較大的菌落。有莢膜菌株的菌落呈輕度粘稠。

當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上共同培養(yǎng)時(shí),金黃色葡萄球菌能合成較多V因子,可促使流感嗜血桿菌生長(zhǎng)。故在金黃色葡萄球菌落周?chē)L(zhǎng)的流感嗜血桿菌菌落較大,離金黃色葡萄球菌落越遠(yuǎn)的菌落越小,此稱(chēng)為衛(wèi)星現(xiàn)象。有助于流感嗜血桿菌菌的鑒定。

在液體培養(yǎng)基中,有莢膜的菌株呈均勻渾濁生長(zhǎng),無(wú)莢膜的R型菌株則為顆粒狀沉淀生長(zhǎng)。

(3)生化反應(yīng):流感嗜血桿菌對(duì)糖發(fā)酵不穩(wěn)定。一般分解葡萄糖只產(chǎn)酸,不分解乳糖或甘露醇,對(duì)麥芽糖、蔗糖或糊精的發(fā)酵不穩(wěn)定。所有菌株還原硝酸鹽。有莢膜菌株產(chǎn)生吲哚。典型菌株不溶血。產(chǎn)生自溶酶,可被膽汁溶解。根據(jù)流感嗜血桿菌產(chǎn)生吲哚,尿酸酶及鳥(niǎo)氨酸脫羧酶反應(yīng),將其分為8個(gè)生化型。

致病性:

主要通過(guò)呼吸道感染,引起原發(fā)性或繼發(fā)性感染。原發(fā)性感染多由b型莢膜強(qiáng)毒株引起,為急性化膿感染,如腦膜炎、鼻咽炎、咽喉會(huì)厭炎、化膿性關(guān)節(jié)炎、心包炎及敗血癥。繼發(fā)感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺結(jié)核等感染后發(fā)生,多為無(wú)莢膜菌株引起。如慢性支氣管炎中耳炎、鼻竇炎、肺炎等。

致病物質(zhì)為內(nèi)毒素、莢膜、菌毛和酶類(lèi)。

微生物檢驗(yàn):

(1)標(biāo)本采集:可采集痰液、腦脊液、鼻咽分泌物及膿液等。

(2)檢驗(yàn)方法:

1)直接鏡檢:痰液、膿液等標(biāo)本可直接涂片,腦脊液可取離心沉淀物涂片,革蘭染色鏡檢。如查到革蘭陰性小桿菌或多形態(tài)桿菌,結(jié)合臨床,可做初步診斷。

2)分離培養(yǎng)與鑒定:將血液、腦脊液標(biāo)本先增菌培養(yǎng)后,再轉(zhuǎn)種巧克力瓊脂平板或選擇性巧克力瓊脂平板,經(jīng)37℃培養(yǎng)24-48小時(shí)。根據(jù)菌落形態(tài)、涂片染色、衛(wèi)星現(xiàn)象,X、V因子需求與否,定種,再作生化試驗(yàn)和莢膜腫脹試驗(yàn)分型。

3)如何提高流感嗜血桿菌的陽(yáng)性率:

①初次培養(yǎng)應(yīng)在5%-10%CO2環(huán)境;

②生長(zhǎng)需要X、V因子,故在培養(yǎng)基中應(yīng)添加此因子;

③應(yīng)用選擇性培養(yǎng)基,如巧克力瓊脂中加一定量抗生素,1ml培養(yǎng)基中含萬(wàn)古霉素50μg,桿菌肽300μg,克林可霉素1μg,嗜血桿菌分離率可達(dá)96.7%.

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