糞便直接涂片檢查寄生蟲的方法是醫(yī)學(xué)檢驗士的重要考點,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理了關(guān)于糞便直接涂片檢查寄生蟲的方法的內(nèi)容,希望可以幫助大家復(fù)習(xí)。
用以檢查蠕蟲卵、原蟲的包囊和滋養(yǎng)體。方法簡便,連續(xù)作3次涂片,可提高檢出率。
(1)蠕蟲卵檢查:滴一滴生理鹽水于潔凈的載玻片,用棉簽棍或牙簽挑取綠豆大小的糞便塊,在生理鹽水中涂抹均勻;涂片的厚度以透過涂片約可辨認(rèn)書上的字跡為宜。一般在低倍鏡下檢查,如用高倍鏡觀察,需加蓋片。應(yīng)注意蟲卵與糞便中異物的鑒別。蟲卵都具有一定形狀和大??;卵殼表面光滑整齊,具固有色澤;卵內(nèi)含卵細(xì)胞或幼蟲。
(2)原蟲檢查:
1)活滋養(yǎng)體檢查:涂片應(yīng)較薄,方法同查蠕蟲卵。氣溫愈接近體溫,滋養(yǎng)體的活動愈明顯。必要時可用保溫臺保持溫度。
2)包囊的碘液染色檢查:直接涂片方法同上,以一滴碘液代替生理鹽水。如碘液過多,可用吸水紙從蓋片邊緣吸去過多的液體。若同時需檢查活滋養(yǎng)體,可在用生理鹽水涂勻的糞滴附近滴一滴碘液,取少許糞便在碘液中涂勻,再蓋上蓋片。涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋養(yǎng)體。
原蟲包囊碘液染色操作方法
碘液配方:碘化鉀4g,碘2g,蒸餾水100ml.
3)隱孢子蟲卵囊染色檢查:目前較佳的方法為金胺酚改良抗酸染色法。對于新鮮糞便或經(jīng)10%福爾馬林固定保存(4℃1個月內(nèi))的含卵囊糞便都可用此法染色。染色過程是先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色法復(fù)染。方法步驟如下:
金胺-酚染色法:
①染液配制:1g/L金胺-酚染色液(第一液):金胺0.1g,石碳酸5.0g,蒸餾水100ml;3%鹽酸酒精(第二液):鹽酸3ml,95%酒精100ml;5g/L高錳酸鉀液(第三液):高錳酸鉀0.5g,蒸餾水100ml.
②染色步驟:滴加第一液于晾干的糞膜上,10~15分鐘后水洗;滴加第二液,1分鐘后水洗;滴加第三液,1分鐘后水洗,待干;置熒光顯微鏡檢查。
低倍熒光鏡下,可見卵囊為一圓形小亮點,發(fā)現(xiàn)乳白色熒光。高倍鏡下卵囊呈乳白或略帶綠色,卵囊壁為一薄層,多數(shù)卵囊周圍深染,中央淡染,似環(huán)狀,或深染結(jié)構(gòu)偏位,有些卵囊全部為深染。但有些標(biāo)本可出現(xiàn)非特異的熒光顆粒,應(yīng)注意鑒別。
改良抗酸染色法:
①染液配制:石炭酸復(fù)紅染色液(第一液):堿性復(fù)紅4g, 95%酒精20ml,石炭酸8ml,蒸餾水100ml;10%硫酸溶液(第二液):純硫酸10ml,蒸餾水90ml(邊攪拌邊將硫酸徐徐傾入水中;20g/L孔雀綠液(第三液):20g/L孔雀綠原液1ml,蒸餾水10ml.
②染色步驟:滴加第一液于糞膜上,1.5~10分鐘后水洗;醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理滴加第二液,1~10分鐘后水洗;滴加第三液,1分鐘后水洗,待干;置顯微鏡下觀察。
經(jīng)染色后,卵囊為玫瑰紅色,子孢子呈月牙形,共4個。其他非特異顆粒則染成藍(lán)黑色,容易與卵囊區(qū)分。
不具備熒光鏡的實驗室,亦可用上述方法先后染色,然后在光鏡低、高倍下過篩檢查,發(fā)現(xiàn)小紅點再用油鏡觀察。效果好,可提高檢出速度和準(zhǔn)確性。
2.厚涂片透明法(改良加藤法)取約5mg