瘧原蟲的基本生活及其診斷是檢驗士考試需要了解的知識點，醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理了相關資料，便于各位同學復習備考！

人體四種瘧原蟲的生活史基本相同?，F(xiàn)以間日瘧原蟲生活史為例，具體如下：

1.在人體內(nèi)發(fā)育 瘧原蟲在人體內(nèi)先后經(jīng)在肝細胞和紅細胞內(nèi)發(fā)育。在肝細胞內(nèi)為裂體增殖，稱紅細胞外期（紅外期）；在紅細胞內(nèi)發(fā)育包括紅細胞內(nèi)裂體增殖期（紅內(nèi)期）和配子體形成的有性期開始。（1）紅細胞外期（exo-erythrocytic，stage）：蚊唾腺內(nèi)含有瘧原蟲子孢子的雌性按蚊刺吸人血時，子孢子隨蚊的唾液進入人體，約30分鐘孢子侵入肝細胞。子孢子入侵肝細胞是由于子孢子表面有一種蛋白（環(huán)子孢子蛋白，CSP）能與肝細胞表面的瘧原蟲受體相結(jié)合，使兩者接觸。然后，子孢子釋放由棒狀體內(nèi)貯存的分泌物，作用于接觸的肝細胞膜，而主動侵入肝細胞。在肝細胞內(nèi)，蟲體中部呈球狀突出，前后端收縮，呈圓形，轉(zhuǎn)變?yōu)樽甜B(yǎng)體（trophozoite）。以后，核開始分裂，進行裂體增殖，形成裂殖體（schizont）。裂殖體逐漸長大，反復進行核分裂，至一定程度胞質(zhì)也分裂，分別包繞核，形成許多裂殖子（merozoite），即為成熟裂殖體（mature schizont）。感染第七天的間日瘧原蟲的成熟裂殖體，直徑約42μm，胞質(zhì)內(nèi)有空泡，內(nèi)含裂殖子約12000個。裂殖子圓形或橢圓形，大小為0.3～0.7μm，由核和少量的胞質(zhì)組成。當裂殖體發(fā)育成熟后，被寄生的肝細胞破裂，裂殖子散出，進入血竇，一部分裂殖子被吞噬細胞吞噬而消失，一部分則侵入紅細胞內(nèi)發(fā)育。

Lysenko等援引Moshkovsky（1973）的學說提出，間日瘧原蟲的子孢子在進入肝細胞后，在發(fā)育繁殖的速度上可能是多態(tài)的（polymorphism），即有發(fā)育快的，稱速發(fā)型子孢子（tachysporozoites，TS）；和發(fā)育慢的，稱為遲發(fā)型子孢子（bradysporozoites，BS）。Krotoski（1980，1982）通過對食蟹猴瘧原蟲（P.cynomolgi bastianellii）的實驗，發(fā)現(xiàn)其子孢子接種猴后3～5天，在肝細胞內(nèi)原蟲直徑為4μm，第7天達5μm，但此后直至感染后105天其大小仍無改變。提出該種瘧原蟲子孢子有兩個類型，一是進入肝細胞后迅速發(fā)育繁殖，產(chǎn)生許多裂殖子，在感染后7～8天侵入血流，進行紅細胞內(nèi)發(fā)育；另一型進入肝細胞后發(fā)育慢，經(jīng)不同時間的休眠期，然后被激活，發(fā)育為裂殖體并繼續(xù)分裂為裂殖子，再進入血流。作者將后者，經(jīng)休眠期的瘧原蟲稱之為休眠子（hypnozoite）。以后進一步證實間日瘧原蟲也有休眠期，并認為休眠子與瘧疾復發(fā)有關系。

（2）紅細胞內(nèi)期（erythrocytic stage）：由肝細胞釋放出的紅細胞外期裂殖侵入紅細胞內(nèi)進行裂體增殖，稱為紅細胞內(nèi)期（紅內(nèi)期）。包括滋養(yǎng)體和裂殖體兩個階段。瘧原蟲經(jīng)Giemsa染劑或Wright染劑染色，光學顯微鏡觀察，核為紫紅色或紅色，胞質(zhì)為藍色，瘧色素不著色，仍呈棕褐色（彩圖1）。

1）滋養(yǎng)體（trophozoite）：是瘧原蟲在紅細胞內(nèi)攝取營養(yǎng)和發(fā)育的階段。當裂殖子侵入紅細胞后，蟲體胞質(zhì)較少，中間出現(xiàn)大空泡，胞質(zhì)呈環(huán)狀，細胞核位于蟲體一側(cè)，頗似戒指的寶石。因此，早期滋養(yǎng)體又稱為環(huán)狀體（ring form）。環(huán)狀體繼續(xù)發(fā)育，長大。間日瘧原蟲和卵形瘧原蟲約經(jīng)8～10小時，惡性瘧原蟲約經(jīng)10小時，三日瘧原蟲約經(jīng)24小時，蟲體增大，伸出偽足，為運動細胞器，同時胞質(zhì)中出現(xiàn)少量瘧色素（malarial pigment）；隨著蟲體繼續(xù)發(fā)育，瘧色素增多，偽足活動增加，出現(xiàn)多種形態(tài)，蟲體有1或2～3個空泡。受染的紅細胞脹大可達1倍，顏色變淡，并出現(xiàn)能染成淡紅色的小點，稱薛氏小點（Schüffner‘s dots）。惡性瘧原蟲的早期滋養(yǎng)體在外周血液中經(jīng)十幾小時的發(fā)育，逐漸隱匿于各種器官組織的毛細血管中，繼續(xù)發(fā)育成滋養(yǎng)體。

2）裂殖體（schizont）：約經(jīng)40小時，間日瘧原蟲晚期滋養(yǎng)體發(fā)育成熟，蟲體變圓，胞質(zhì)內(nèi)空泡消失，核開始分裂，稱未成熟裂殖體（immature schizont）。之后核繼續(xù)分裂，胞質(zhì)隨之分裂，瘧色素漸趨集中。最后，分裂的每一小部分胞質(zhì)包繞一個胞核，形成裂殖子。這時含有裂殖子的蟲體稱為成熟裂殖體。間日瘧原蟲的成熟裂殖體常充滿于被寄生的紅細胞，最近形成12～24個裂殖子。裂殖子長約1.5μm，寬約1μm.在紅細胞受染后48小時左右，形成成熟裂殖體。此時紅細胞出現(xiàn)泡狀隆起，脹大而失去其雙凹面形狀。由于裂殖子的運動，導致紅細胞破裂，裂殖子逸出進入血漿。從紅細胞釋出裂殖子的全過程約需1分鐘。在血液中的裂殖子，一部分被吞噬細胞吞噬，一部分侵入健康的紅細胞，重復裂體增殖過程。

（3）配子體形成：瘧原蟲經(jīng)過幾次紅細胞內(nèi)裂體增殖，部分裂殖子在紅細胞內(nèi)不再進行裂體增殖，而發(fā)育為雌性配子體（female gametocyte，即macrogamete cyte）或雄性配子體（male gametocyte，即microgametocyte），這是瘧原蟲有性生殖的開始。間日瘧原蟲配子體呈圓形或橢圓形，瘧色素均勻分布于蟲體內(nèi)，核1個。雌性配子體胞質(zhì)致密，色深藍，蟲體較大，占滿脹大的紅細胞；核稍小，深紅色，多位于蟲體一側(cè)。雄性配子體胞質(zhì)淺藍而略帶紅色；核較大，淡紅色，多位于蟲體的中央。成熟的雌雄配子體如被適宜的按蚊隨同血液吸入蚊胃后，即可繼續(xù)發(fā)育。否則經(jīng)一定時間后即變性，而被吞噬細胞吞噬。

四種瘧原蟲寄生的紅細胞時期不同。間日瘧原蟲和卵形瘧原蟲主要寄生于網(wǎng)織紅細胞，三日瘧原蟲多寄生于較衰老的紅細胞，而惡性瘧原蟲可寄生于各時期的紅細胞。配子體在人體末梢血液中開始出現(xiàn)的時間也有差別。間日瘧原蟲在裂體增殖期出現(xiàn)2～3天后可在末梢血液中查見到配子體，而惡性瘧原蟲則在7～10天之后。

實驗診斷

1.病原學診斷

厚、薄血膜染色鏡檢是目前最常用的方法。從受檢者外周血液中檢出瘧原蟲是確診的最可靠依據(jù)，最好在服藥以前取血檢查。取外周血制作厚、薄血膜，經(jīng)姬氏或瑞氏染液染色后鏡檢查找瘧原蟲。薄血膜中瘧原蟲形態(tài)完整、典型，容易識別和鑒別蟲種，但原蟲密度低時，容易漏檢。厚血膜由于原蟲比較集中，易檢獲，但染色過程中紅細胞溶解，原蟲形態(tài)有所改變，蟲種鑒別較困難。因此，最好一張玻片上同時制作厚、薄兩種血膜，如果在厚血膜查到原蟲而鑒別有困難時，可再檢查薄血膜。惡性瘧在發(fā)作開始時，間日瘧在發(fā)作后數(shù)小時至10余小時采血能提高檢出率。

2.免疫學診斷

（1）循環(huán)抗體檢測：常用的方法有間接熒光抗體試驗、間接血凝試驗和酶聯(lián)免疫吸附試驗等。由于抗體在患者治愈后仍能持續(xù)一段時間，且廣泛存在著個體差異，因此檢測抗體主要用于瘧疾的流行病學調(diào)查、防治效果評估及輸血對象的篩選，而在臨床上僅作輔助診斷用。

（2）循環(huán)抗原檢測：利用血清學方法檢測瘧原蟲的循環(huán)抗原能更好地說明受檢對象是否有活動感染。常用的方法有放射免疫試驗、抑制法酶聯(lián)免疫吸附試驗、夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗和快速免疫色譜測試卡 （ICT）等。

3.分子生物學技術 PCR和核酸探針已用于瘧疾的診斷，分子生物學檢測技術的最突出的優(yōu)點是對低原蟲血癥檢出率較高。用核酸探針檢測惡性瘧原蟲，其敏感性可達感染紅細胞內(nèi)0.0001%的原蟲密度。國內(nèi)學者采用套式 PCR技術擴增間日瘧原蟲 SSU rRNA基因120bp的特定片段，其敏感性達0.1原蟲/μl血。