了解生化分析儀基本參數(shù)的原理,有利于儀器、試劑的正確使用,有助于正確分析和處理測定數(shù)據(jù)。但是,配套系統(tǒng)的原裝分析參數(shù)不宜更改;采用非儀器配套的試劑及校準品體系時,參數(shù)修改要慎重,對于不同儀器、不同類型的反應分析程序,所顯示的人機對話分析參數(shù)信息有所不同。
一、反應監(jiān)測時間
對于終點法來說,讀取反應達到平衡時的吸光度計算樣品中待測物的濃度。對于連續(xù)監(jiān)測法來說,要注意觀察反應進程曲線,從而確定反應的預孵育期,延遲時間、連續(xù)監(jiān)測的時段。對于一級或偽一級反應來說,連續(xù)監(jiān)測的時間是一級反應的動態(tài)期的吸光度;對于基于零級反應的酶催化活性濃度速率法測定,連續(xù)監(jiān)測的是零級線性反應期的吸光度。對于連續(xù)監(jiān)測法來說,動態(tài)反應期的時間越長,越適用于臨床應用,對于以酶為工具的代謝物酶促動力測定法,要增加醫(yī)學`教育網(wǎng)搜集整理動態(tài)反應期,即延長反應達到平衡的時間,可在反應體系中加入競爭性抑制劑,這樣還可以提高測定的線性范圍,對于酶催化活性濃度連續(xù)監(jiān)測法來說,一定要注意線性反應時間,有的酶,例如,以硫代丁酰膽堿為底物的血清假性膽堿酯酶速率測定法,線性反應時間只有90秒。對于連續(xù)監(jiān)測法來說,在監(jiān)測期至少應讀4個點(3個△A)。
多數(shù)全自動生化分析儀可以在整個測定反應周期連續(xù)監(jiān)測(如HITACHI7170常規(guī)測定周期10分鐘、監(jiān)測34點,OLYMPUSAU600固定周期8分15秒、監(jiān)測27點),但反應監(jiān)測時間是指該時間內的測定讀數(shù)要用于結果計算。它的設置與加樣點、加試劑點(包括R1、R2……)、監(jiān)測時間(讀數(shù)點)、讀數(shù)間隔時間及試劑樣品比例等有關,要結合方法學,兼顧權衡。
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