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霍亂檢查:
1.血液檢查
紅細(xì)胞和血紅蛋白增高,白細(xì)胞計(jì)數(shù)增高,中性粒細(xì)胞及大單核細(xì)胞增多。血清鉀、鈉、氯化物和碳酸鹽降低,血pH下降,尿素氮增加。治療前由于細(xì)胞內(nèi)鉀離子外移,血清鉀可在正常范圍內(nèi),當(dāng)酸中毒糾正后,鉀離子移入細(xì)胞內(nèi)而出現(xiàn)低鉀血癥。
2.尿檢查
少數(shù)病人尿中可有蛋白、紅白細(xì)胞及管型醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
3.病原菌檢查
(1)常規(guī)鏡檢可見黏液和少許紅、白細(xì)胞。
(2)涂片染色取糞便或早期培養(yǎng)物涂片作革蘭染色鏡檢,可見革蘭陰性稍彎曲的弧菌。
(3)懸滴檢查將新鮮糞便作懸滴或暗視野顯微鏡檢,可見運(yùn)動(dòng)活潑呈穿梭狀的弧菌。
(4)制動(dòng)試驗(yàn)取急性期病人的水樣糞便或堿性胨水增菌培養(yǎng)6小時(shí)左右的表層生長物,先作暗視野顯微鏡檢,觀察動(dòng)力。如有穿梭樣運(yùn)動(dòng)物時(shí),則加入01群多價(jià)血清一滴,若是01群霍亂弧菌,由于抗原抗體作用,則凝集成塊,弧菌運(yùn)動(dòng)即停止。如加01群血清后,不能制止運(yùn)動(dòng),應(yīng)再用0139血清重作試驗(yàn)。
(5)增菌培養(yǎng)所有懷疑霍亂患者糞便,除作顯微鏡檢外,均應(yīng)作增菌培養(yǎng)。糞便留取應(yīng)在使用抗菌藥物之前,且應(yīng)盡快送到實(shí)驗(yàn)室作培養(yǎng)。增菌培養(yǎng)基一般用pH8.4的堿性蛋白胨水,36~37℃培養(yǎng)6~8小時(shí)后表面能形成菌膜。此時(shí)應(yīng)進(jìn)一步作分離培養(yǎng),并進(jìn)行動(dòng)力觀察和制動(dòng)試驗(yàn),這將有助于提高檢出率和早期診斷。
(6)分離培養(yǎng)常用慶大霉素瓊脂平皿或堿性瓊脂平板。前者為強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基,36~37℃培養(yǎng)8~10小時(shí)霍亂弧菌即可長成小菌落。后者則需培養(yǎng)10~20小時(shí)。選擇可疑或典型菌落,應(yīng)用霍亂弧菌“0”抗原的抗血清作玻片凝集試驗(yàn),若陽性即可出報(bào)告。近年來國外亦有應(yīng)用霍亂毒素基因的DNA探針,作菌落雜交,可迅速鑒定出產(chǎn)毒01群霍亂弧菌。
(7)PCR檢測(cè)新近國外應(yīng)用PCR技術(shù)來快速診斷霍亂。其中通過識(shí)別PCR產(chǎn)物中的霍亂弧菌毒素基因亞單位CtxA和毒素協(xié)同菌毛基因(TcpA)來區(qū)別霍亂菌株和非霍亂弧菌。然后根據(jù)TcpA基因的不同DNA序列來區(qū)別古典生物型和埃爾托生物型霍亂弧菌。4小時(shí)內(nèi)可獲結(jié)果,據(jù)稱能檢出每ml堿性蛋白胨水中10條以下霍亂弧菌。
(8)鑒別試驗(yàn)古典生物型、埃爾托生物型和0139型霍亂弧菌的鑒別。
4.實(shí)驗(yàn)室檢查
(1)血常規(guī)及生化檢查Wbc↑N↑Rbc↑Na+↓k+↓cl-HCO-3↓Bun↑cr↑。
(2)尿常規(guī)鏡檢查少許紅細(xì)胞、白血病、蛋白質(zhì)、管型。
(3)糞便檢查①常規(guī)檢查黏液少許紅細(xì)胞、白細(xì)胞②涂片染色革蘭陰性彎曲弧菌③懸滴檢查運(yùn)動(dòng)活潑呈穿梭壯的弧菌④制動(dòng)試驗(yàn)堿性胨水6H生長物⑤增菌培養(yǎng)PH8.4堿性蛋白胨水36~37℃6~8H→菌膜→動(dòng)力制動(dòng)分離培養(yǎng)⑥分離培養(yǎng)O抗原的抗血清作玻片凝集試驗(yàn)
(4)血清免疫學(xué)檢查抗菌抗體抗腸毒素抗體抗凝集素。
5.常規(guī)檢查
(1)直接鏡檢①直接涂片染色:將標(biāo)本涂片,固定后用1∶10稀釋石炭酸復(fù)紅染色和革蘭染色,鏡檢有無典型弧菌。典型霍亂弧菌互相連接平行排列,有如“魚群”。②懸滴標(biāo)本:將標(biāo)本制成懸滴,鏡檢細(xì)菌動(dòng)力,最好用暗視野顯微鏡?;魜y弧菌運(yùn)動(dòng)活潑,呈小魚穿梭狀。
(2)分離培養(yǎng)將吐瀉物直接或先經(jīng)堿性胨水增菌后,接種于慶大霉素瓊脂等培養(yǎng)基,容易檢出霍亂弧菌。應(yīng)用熒光抗體檢測(cè)糞便中霍亂弧菌,可于1~2小時(shí)內(nèi)獲得結(jié)果。
(3)血清學(xué)檢查可作血清凝集試驗(yàn)。在發(fā)病第1~3日及第10~15日各取1份血清,若第2份血清的抗體效價(jià)比第1份增高4倍或4倍以上,有診斷參考價(jià)值。
(4)制動(dòng)試驗(yàn)—快速診斷在急性病人的水樣便中含有大量弧菌,如懸滴檢查陽性,再滴加不含防腐劑的霍亂多價(jià)血清(使用濃度為1∶64),幾分鐘內(nèi)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)停止,凝集成塊即為陽性。
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