目前我國縣級以上包括縣醫(yī)院均配置有全自動生化分析儀,甚至沿??h區(qū)的中心衛(wèi)生院也配備了,絕大部分為自建檢測系統(tǒng)。問及校準他們會拿出來的是K值記錄,問及K值怎么得來的?都說用一個校準品的標示值來定標,K值自動顯示。把一點定標作為校準對待,這樣做對嗎?另一方面,使用校準品也有問題,這些都值得深思。
一、校準與定標有無區(qū)別?
校準與定標均來自英文“Calibrate”一詞,似乎沒有什么區(qū)別。讓我們首先復習一下校準的定義和內(nèi)涵。
我們查閱和溫習了《臨床實驗室質(zhì)量控制(QC)》的要求,上面對“校準”是這樣描述的:“在一定條件下的一系列操作來確定檢測儀器和檢測系統(tǒng)所指示的量值,或者某一物質(zhì),或者參考物質(zhì)代表的值,與相應標準所認識量之間的關系。”接下來必需做“校準驗證”,“就是要求按標本方式對校準品進步分析,以檢查并證實儀器、試劑盒或檢驗系統(tǒng)的檢驗結(jié)果在規(guī)定的報告范圍內(nèi)保持穩(wěn)定。”這才是規(guī)范化的校準過程。同時文件指出自己建立的檢測系統(tǒng)必須建立校準方法:①選擇合適的校(標)準品,包括校(標)準品的數(shù)目、類型和濃度;②如有可能,校(標)準品應溯源到參考方法和或參考物質(zhì);③確定校準的頻度。同時建立校準驗證方法:①如有可能,方法應追溯到參考方法或己知值的參考品;②確定校(標)準品的數(shù)目類型和濃度,校準驗證的接受限,以及校準驗證的頻度;③確定檢驗詰的報告范圍,確定時必須包括一個最小值,中間值和此范圍的上限的最大值。同時還規(guī)定六個月以及有下列情況發(fā)生時,進行一次校驗,如儀器或檢測系統(tǒng)進行過一次大的預防性維護或者更換了重要部件;質(zhì)控反映出異常趨勢或偏移,或者超出了實驗室規(guī)定的接受限,采取一般性糾正措施后,不能識別和糾正問題時。最后特別強調(diào)所有進行過的校準和校準驗證工作時必須記錄并寫成文件。
馮仁豐教授在《CLIA’88更新規(guī)則介紹》報告中也論及校準和校準驗證(確認):“要求校準的項目,你必須繼續(xù)按照廠商要求,進行校準和校準確認(驗證)。但是,校準和校準確認(驗證)至少半年進行一次,在檢驗的可報告范圍內(nèi),至少用三個水平予以確認。”
通過上述文件和專家報告學習,我們應該十分請楚校準的涵意,應該包括校準和校準驗證兩個方面,正確的校準和校準驗證對于檢驗結(jié)果在規(guī)定的報告范圍內(nèi)的準確和可靠是必要的。
在正規(guī)文件中,我們還沒有找到“定標”的名詞解釋。但在儀器中文說明書上倒有定標名詞多次出現(xiàn)。
二、“單點定標”作校準可不可以?
涂植光教授主編的《臨床檢驗生物化學》在“臨床生物化學自動分析析方法”(P.364)中提及“分析儀器測定方法基本上都需要校準(Calibration),也稱定標,因為分光光度法可以看成是比例光度法。”同時在標準液個數(shù)及濃度時又說“校準曲線線性好并通過坐標零點,可采用一個校準液;線性好的但不通過坐標零點,應使用兩個以上的校準液。對于校準曲線呈非線性者,必須使用3個以上校準液,每一個校準液都有一個合適的濃度”。著者后面也談及校準核查。
馮仁豐教授在從玉隆教授主編《臨床實驗室管理》第四章“臨床檢驗質(zhì)量管理技術基礎”(P.62)大多數(shù)檢驗室又習慣以單一標準來校準結(jié)果,原則上應在標準曲線呈通過原點的直線時才可作這樣的處理。呈不通過原點的直線關系時,至少應使用兩點定標;呈拋物曲線狀時,應使用多點定標。
通過上述復習,“單定定標”作校準應該是條件的,如果廠家有關方法穩(wěn)定性文件或者自建檢測系統(tǒng)的評價中,已經(jīng)證明該項目性能特點之一的標準曲線是線性關系,而且a值幾乎為0,即Y=bX,我也認為可以用單點定標作校準,但可不能忘記做校準驗證。如果某項目雖屬線性,但a不等于0,即存在截距,它的方程應該是Y=a+b1X的話,您用單點校準,硬把它作Y=b2X處理,既有斜率變化,也存在截距a造成偏差,用定標點A值代入兩個方程式,應該結(jié)果是一樣的,但離您定標點較遠的濃度標本會造成較大偏差。截距a是正值或負值造成偏差也不同了。如果您應用“校準驗證”高、中、低值校準品就會發(fā)現(xiàn),離定標點較遠的濃度帶采較大誤差,同時肯定也通不過“校準驗證”。如果某項目標準曲線不是線性而是拋物曲線,只能用多點校準和校準驗證了,更不能用單點定標作校準。
當今我們知道國內(nèi)不少單位都是自建檢測系統(tǒng),而且也未對每一項目做過性能評價,標準曲線的性質(zhì)不明,如果您用單點定標作校準,也不做校準驗證,就轉(zhuǎn)入測定標本,就必然陷入我說的誤區(qū)或陷阱。所以用“單點定標”作校準要注意前堤和一定要進行校準驗證。
三、校準品亂用十分普遍,不知道校準品有專用性
上個世紀50年代都用標準品或標準液來校準檢測方法,那時使用標準品時不強調(diào)它的專用性。后來發(fā)現(xiàn)這樣做法忽視了標本和標準處于完全不同基質(zhì)狀態(tài),知道有基質(zhì)和基質(zhì)效應后,不宜再用標準液了,約20年前開始引用具有與患者樣品基質(zhì)相似的校準品替代標準品,用于日常工作以消除基質(zhì)效應。但校準品具有專用性,它只能專用于指定的某公司型號的儀器、試劑、方法和檢測程序組成的檢測系統(tǒng),才能起校準和溯源作用。所以校準品只能為指定的檢測系統(tǒng)服務,不能對其他系統(tǒng)作校準用。如果用在其它檢測系統(tǒng)作校準,將會嚴重影響檢驗質(zhì)量,使病人樣品的檢測結(jié)果不可靠,更不具有溯源性。由于部分同志對校準品專用性認識不足,所以校準品亂用十分普遍,我們應該及時糾正?,F(xiàn)在最實用的是利用病人新鮮標本(其實是最佳校準品)和方法學比較為基礎,實現(xiàn)標準轉(zhuǎn)移的辦法。或者在自建檢測系統(tǒng)校準后,將優(yōu)質(zhì)某批號校準品重新定靶值,然后用己建有新靶值該批號校準品來作本自建檢測系統(tǒng)校準用,這種做法也僅僅是過渡辦法而己。
雖然國外也有生產(chǎn)具有多個校準值的校準品,但只適應國外知名品牌的封閉檢測系統(tǒng),不一定能用于我國多種多樣的自建檢測系統(tǒng),何況還必須通過科學比對才能知曉可否使用,當今不能解決我們面臨的實際問題。據(jù)悉目前國內(nèi)外正試圖研發(fā)幾乎沒有基質(zhì)效應的互通性校準品,如果獲得成功并能大量供應市場,對我們來講將是一個好消息。