膽紅素是體內(nèi)衰老的紅細胞經(jīng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的破壞和肝臟轉(zhuǎn)化的代謝產(chǎn)物,其含量的變化對疾病的診斷具有重要意義。總膽紅素的檢測方法常用的有重氮試劑法、膽紅素氧化酶法以及直接分光光度計法。作者采用二氯苯重氮鹽法(DPD法)的兩種試劑盒以及RocheModularP和BayerRA-1000型生化分析儀,檢測血清和血漿總膽紅素(TBil),結(jié)果報告如下。
材料與方法
標(biāo)本采集選擇98例來我院的體檢者,隨機分成兩組每組49例。按常規(guī)方法抽取靜脈血4ml,注入普通干燥管中2ml置37℃水浴30min后離心分離血清。另外2ml注入肝素鈉抗凝管中(每ml血中肝素鈉含量為25U),混勻后立即分離血漿。
檢測方法
采用RocheModularP生化分析儀和Roche公司提供的DPD法總膽紅素檢測試劑盒,雙試劑、雙波長(546nm,600nm),并采用Rochecfs和Precinorn-u質(zhì)控物進行校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控。對49例被檢測者的血清和血漿TBil進行檢測。
同時應(yīng)用BayerRA-1000型生化分析儀和中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)的DPD法TBil檢測試劑盒。雙試劑臨用前配成工作液,檢測波長為550nm,并同時用該公司的質(zhì)控品做室內(nèi)質(zhì)控。
數(shù)據(jù)處理采用SPSS10.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理,計量資料采用t檢驗和配對資料的χ2檢驗。
結(jié)果
采用Roche和中生試劑在RocheModularP和BayerRA-1000生化分析儀,檢測血清和血漿TBil結(jié)果(表1)。
結(jié)果表明,采用Roche原裝試劑和生化分析儀所檢測的血清和血漿TBil無顯著性差異(P>0.05);使用中生試劑和BayerRA-1000型生化分析儀檢測的血漿TBil明顯高于血清TBil,差異有非常顯著性(P<0.01)。
討論
TBil的檢測方法常用的有重氮試劑法、膽紅素氧化酶法和直接分光光度計法。重氮試劑法中又有改良J-G法、二氯苯重氮鹽(DPD)法和二甲亞楓法等多種方法。作者采用DPD法檢測原理,由Roche公司生產(chǎn)的原裝試劑盒和生化分析儀雙波長(546nm,600nm)檢測血清和血漿TBil,結(jié)果無顯著性差異(P>0.05),而采用中生試劑公司生產(chǎn)的試劑盒在BayerRA-1000型生化分析儀單一波長(550nm)檢測的血漿TBil明顯高于血清TBil,結(jié)果有非常顯著差異(P<0.01)。結(jié)果表明不同儀器和不同廠家生產(chǎn)的試劑盒檢測血漿和血清TBil其結(jié)果是有差異的。這與李美珠等人應(yīng)用奧林巴斯AU5400生化分析儀以及和光純藥工業(yè)株式會社提供的釩酸鹽氧化法檢測血漿TBil14.90μmol/L,血清TBil14.27μmol/L(t=1.93);以及陰斌霞等應(yīng)用日立7170A生化分析儀、日本第一化學(xué)株式會社提供的試劑盒檢測血漿TBil11.58μmol/L、血清TBil9.06μmol/L(t=2.084);閃金忠等所檢測的血漿TBil19.2μmol/L、血清TBil18.8μmol/L(t=1.08)是有所差別的。作者認(rèn)為其差別可能與不同檢測方法、不同試劑盒和不同儀器等多因素的方法不同有關(guān)。WHO于2002年發(fā)表的專題報告中推薦在56項臨床檢測項目中使用血漿,不僅可以提高檢驗速度,還可以避免細胞內(nèi)成分的釋出后對結(jié)果的影響。作者應(yīng)用Roche試劑和儀器檢測血漿和血清TBil其結(jié)果未見顯著性差異,建議為了準(zhǔn)確檢測血漿TBil,應(yīng)采用更穩(wěn)定且不易受諸因素干擾的試劑盒和高精度的生化分析儀。